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定眩合剂对椎基底动脉供应血不足影响论文:定眩合剂对椎基底动脉供应血不足兔脑去甲肾上腺素、5-羟色胺含量


定眩合剂对椎基底动脉供应血不足影 响论文:定眩合剂对椎基底动脉供应血不足 兔脑去甲肾上腺素、5-羟色胺含量及血液流 变学的影响
【摘要】 目的观察中药定眩合剂(Dingxuanheji)

对兔椎基底动脉供血不足 (VBI) 脑组织去甲肾上腺素 (NE) , 5-羟色胺(5-HT)含量及血液流变学的影响。方法选健康青 紫兰兔 40 只,随机分为空白组,模型组,西比灵组,定眩合 剂高、低剂量组,每组 8 只,除空白组外其余各组高脂饲料 喂养并注射硬化剂,7 d 重复 1 次,6 周后造模成功,再连 续给相应药物 4 周后处死,进行指标测定。结果定眩合剂能 使椎基底动脉供血不足动物脑组织 NE,5-HT 的含量增加, 并使血液流变学主要指标降低, 减少了血栓形成的可能。结 论定眩合剂可提高 NE,5-HT 的含量,通过改善通气状况对 VBI 脑组织具有保护作用, 并能有效改善血液流变学,血液流 变学水平的高低可反映椎基底动脉供血不足病变的程度及 治疗效果。 【关键词】 定眩合剂; 椎-基底动脉供血不足; 去甲肾

上腺素; 5-羟色胺

Abstract:ObjectiveTo study effects of DXHJ on the NE,5-HT contents of Brain Tissue and blood rheology in Vertebro-basilar Artery insufficiency model rabbits. Methods40 rabbits were randomly divided into 5 groups, normal group, model group, Flunarizine group and DXHJ high, low dose groups.Except normal group, the rest were fed by high fat diet, and injected Yinghuaji once a week for six weeks. Ten weeks later, the rabbits were sacrificed and the chose targets were tested. ResultsThe DXHJ could raise the cortents of monoamine neurotransmitters, and decrease blood viscosity.ConclusionDXHJ can elevate the contents of monoanine renrotarsinitters, protect VBI brain from damage, and improve hemorheology. Key words: Dingxuanheji; insufficiency; NE; 5-HT; Vertebrobasilar

椎基底动脉供血不足(VBI)是由于短暂性血液供应不 足导致脑干、小脑或枕叶皮层缺血的一组临床综合征,是神 经系统的常见病、多发病,其特点为反复发作,缠绵难愈,每 年有 10%的病人发生完全性脑卒中, 急性基底动脉闭塞或急

性双侧椎动脉闭塞的死亡率则高达 80% 以上。 因此对 VBI 进 行积极的治疗, 无论在临床上, 还是在预防医学上均有很 大的意义。脑内单胺类神经递质是一类具有广泛生物学活性 的物质,在中枢神经系统参与许多生理反应。这些物质在组 织中的含量是反映神经递质生物合成、释放、摄取、失活等 过程的生化指标,在研究神经元功能状态或研究药物对神经 组织作用的影响时,常用这些生化指标。近年来发现,病理情 况下它与脑血管病关系密切[1],本研究主要观察定眩合 剂(DXHJ) 对椎基底动脉供血不足脑组织中单胺类神经递质 去甲肾上腺素(NE) 、5-羟色胺(5-HT) 含量的影响及其血液 流变学的改变,探讨 DXHJ 的作用机制。 1 1.1 材料与仪器 动物健康青紫兰兔 40 只 , 雌雄各半, 体质量

( 2.0±0.3) kg, 兔龄 3~4 月, 合格证号: 医动字号 14-004, 由兰州生物制品研究所实验动物室提供,附合一级实验动物 质量标准。室温 18~20℃,湿度 65%~70%,实验前适应性喂 养 3 d 后随机分为 5 组, 即空白组、模型组,西比灵组,定 眩合剂高、低剂量组,每组 8 只。 1.2 药物及试剂定眩合剂由甘肃省中医院制剂室配制

(药物组方:岷当归,川芎,半夏,天麻,白术,茯苓,陈

皮,钩藤,甘草) ; 西比灵由西安杨森制药有限公司生产, 批号:20080109;消痔灵注射液由吉林省集安益盛药业股份 有限公司生产,批号:080321;利多卡因,批号:0708022; 胆固醇购自北京双旋生物培养基制品厂,批号:20070606。 猪油,鸡蛋,白糖,市售,自备。NE,5-HT 试剂盒购自美国 ADL 公司。 1.3 仪器经颅多普勒血流检测仪为美国卜

ledasoraics TCD 仪,探头频率 2HzIz;日立高速低温冷冻 离心机;722 s 分光光度计,上海紧密科学仪器有限公司产 品。 2 2.1 方法 造模方法参照成都中医药大学郑重等[2]的造模

方法,用硬化剂(消痔灵与利多卡因按 1∶1 混合)10 ml, 于家兔左侧 C3~C5 颈椎横突侧面,进针以感觉到横突边缘 为准,回抽针栓无血、无气、无脑脊液,然后推注硬化剂, 于 7 d 后重复注射一次。同时除空白组外其余各组高脂饲料 喂养(高脂饲料由 2%胆固醇、5%鲜蛋黄、3%白糖、10%猪油、 80%基础饲料配制而成)[3]。6 周内造模成功,以 TCD 检 验造模成功。

2.2

给药方式将 40 只青紫兰兔随机分为 5 组,即空白

组,模型组,西比灵组,定眩合剂高、低剂量组。西比灵组 以西比灵 1.2 mg/(kg·d),并以每千克体重 10 ml 蒸馏水稀 释,制成混悬液灌胃;治疗组分别予定眩合剂低、高剂量 [3.6 ,7.2 ml/(kg·d)]灌胃(本品每毫升含天麻以天麻 素计,不得少于 0.19 mg);模型组同时灌胃以相应体积的 生理盐水;空白组不予任何处理。此后,每周秤一次体重, 根据体重调整给药量。 2.3 2.3.1 指标测定 脑组织单胺类神经递质的测定脑组织匀浆的制

备:实验用家兔断头处死,迅速打开颅腔,在冰浴中迅速分 离大脑脑干,放于硫酸纸上称重,将脑组织放入装有 3 ml 预冷生理盐水中,退去纸重求得脑组织的净量,按 1∶30 的 比例补充生理盐水量制成组织匀浆,将组织匀浆倒入带塞离 心管中, 振荡 5 min, 然后 4℃在 3 000 r· min-1 离心 15 min, 取上清液,2~8℃冰柜保存酶联免疫吸附法测定脑组织 NE, 5-HT 含量。 2.3.2 血液流变学测定每组兔子在清醒状态下,心脏

穿刺取血, 肝素抗凝。将 5 ml 血液放入毛管式自动显示流

变仪中操作, 观察 5 组动物全血粘度、血浆粘度与红细胞压 积的变化。 2.4 统计学处理应用 SPSS 10.0 软件,实验所得数据

均以±s 表示,各组间两两比较采用 F 检验。 3 3.1 1 结果与分析 各组 NE, 5-HT 含量的比较 结果见表 1。 表

定眩合剂对模型家兔 NE,5-HT 的影响(略) 3.2 各组血液流变学的比较结果见表 2。表 2 定眩合

剂对模型家兔血液流变学全血黏度的影响(略) 表 1 结果表明,模型组脑组织内 NE、5-HT 含量与空白 组比较明显降低(P<0.01)。应用定眩合剂后,低剂量治疗 组兔脑组织内 NE、5-HT 含量无明显变化(P>0.05),高剂 量组与模型组比较差异有显著性( P<0. 05, P<0.01),随 着定眩合剂治疗量的增加,高剂量组与小剂量组之间有差异 (P<0.05),实验动物脑内 NE,5-HT 含量增高。

表 2 资料经统计学处理表明:模型组与空白组比较差异 有显著统计学意义(P<0.01) ,提示模型组血黏度明显高于 正常组;西比灵组与模型组比较差异无统计学意义

(P>0.05) ,提示西比灵无降低血黏度作用;定眩合剂高剂 量组与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05) ,提示定眩 合剂低、高剂量干预模型家兔后血黏度基本恢复至正常水 平。 4 讨论 4.1 定眩合剂对 NE、5-HT 含量的影响椎-基底动脉的

供血是脑部血液供应的重要系统。本实验结果显示了实验动 物脑组织单胺类神经递质与 VBI 之间病理生理上的密切关 系。脑内单胺类神经递质 NE、5-HT 是由神经细胞合成后储 存于囊泡内,当动作电位到达神经末梢时,在 Ca2+ 的参与下 通过酶解或再摄取被迅速清除。 Birthelmer 等 [4~6] 认 为中枢神经系统缺血期间可刺激脑内单胺类递质如 5-HT、 NE 等的大量释放,这些递质又是 Ca2+的激动剂,可开启 Ca2+ 通道闸门,使 Ca2+大量流入胞内,神经元内钙超载;另一方 面,缺血前已合成的神经递质大量释放进入细胞间隙, 细胞 间隙蓄积的单胺类神经递质在脑缺血过程中发挥更多的损 伤作用,使神经元破坏加剧,最后这些递质一部分被降解, 一部分被带入脑脊液及血液中,终使脑组织中递质含量下 降。另有研究表明[7,8] , 某些神经元有单胺类介质与 肽类物质共存, 在脑缺血后, 这两类物质的水平都发生了

改变,β 内啡肽控制 5-HT 的含量, β 内啡肽减少时, 5-HT 水 平就增高, β 内啡肽增高时, 5-HT 水平就减少, 5-HT 含量 下降促使β 内啡肽释放增加,从而引起通气抑制,缺氧状态 下脑 5-HT 含量升高有助于改善通气状况。定眩合剂中含有 当归内酯,川芎嗪,天麻素,钩藤碱等有效成分。当归内酯 对缺血脑组织有保护作用[9] ;川芎的有效成分为川芎嗪 和阿魏酸,川芎嗪可迅速透过血脑屏障,在脑部发挥扩血管、 改善微循环和抑制血小板聚集作用,对脑缺氧有明显的对抗 作用[10] ;钩藤碱降低细胞内 Ca2+超载,还具有改善低 氧性脑代谢紊乱作用[11] 。天麻制剂具有抑制能量代谢 障碍的作用[12] ,本实验发现,定眩合剂高剂量干预的 VBI,单胺类胺神经递质含量明显高于非干预组。提示定眩 合剂有助于提高 NE、5-HT 含量,通过改善通气状况对缺血、 缺氧性脑组织具有保护作用。以上资料表明, 脑组织中 NE 和 5-HT 含量的下降对缺血脑组织产生不利影响。本实验结 果证明椎基底动脉供血不足模型 NE、 5-HT 含量显著降低, 服 用定眩合剂后改善明显。 4.2 定眩合剂对血夜流变学的影响椎基底动脉供血不

足的发病主要是血流动力学改变所致,少数可能由微栓子引 起,血液流变学与中医血瘀的关系密切,血流流变学指标反 映血液的黏滞性、浓稠性、聚集性和凝固性,是血瘀证病理

变化的重要参数。全血黏度主要由红细胞和变性能力所决定, 家兔的红细胞与人相同,均为无核红细胞,其聚集性与人相 对接近, 当血液黏滞度增高、显著的高黏状态,这势必影响 微循环的灌注; 全血黏度增高则血液流动性差, 最终导致 微循环障碍。当归及其水溶性成分阿魏酸能抑制血小板释放 5-HT ,后者是血小板聚集的促进剂;阿魏酸也能提高血小板 中环磷酸腺苷(cAMP) 浓度,抑制血栓素 A2 ( TXA2 ) 的合成 [13];天麻的有效成分天麻素能抑制血小板粘附,阻止血 栓形成。本实验较全面地反映了不同切变率下的全血黏度变 化。与正常组比较,造模后模型组低、高切变率明显增高,说 明本法造模可增加家兔血液的黏滞性。定眩合剂对低、高切 变率下的全血黏度有显著降低作用,从一个侧面证明了定眩 合剂确有化瘀作用。根据本研究结果,定眩合剂可有效降低 VBI 家兔明显升高的全血粘度, 增加该模型家兔的脑血流量, 降低血黏度。从本文资料分析,椎基底动脉供血不足家兔,血 液流变学存在明显异常,这与文献报道一致[14] 。

本病在祖国医学属眩晕范畴。《素问·至真要大论篇》 云“诸风掉眩,皆属肝木” 。肝为风木之脏,肝肾阴虚,不足 于下,阳亢化风,挟痰上扰,清空失养,是眩晕发生的基本病 机,属本虚标实证。DXHJ 就是根据这一理论进行组方。方中

当归、川芎活血,祛瘀,通络,调节血管张力,天麻、钩藤 平肝熄风定眩;半夏燥湿化痰、降逆止呕;橘红理气化痰。 诸药合用共奏补虚固本、祛痰通络、益气活血定眩之功。故 DXHJ 主要以上述 4 种药物成分为主有效调整中枢神经递质的 合成,恢复脑干内单胺类神经递质的平衡,增加大脑供血供 氧,降低血液黏度,血流动力学改变可使脑干内血流减少至 功能阈值以下时即可出现 VBI 发作[15] 。 【参考文献】 [1]Milusheva E,Sperlagh B, Shikova L, et al. Nonsynaptic release of 3H] noradrenaline in response [ to oxidative stress combined with mitochondrial dysfunction in rat hippocampal slices [J].Neuroscience,2003, 120 (3) : 771.

[2]朱明双,郑重,黄勇,等.注射硬化剂法制作家兔 颈椎病椎动脉型模型[J].成都中医药大学学报,2000,23 (3):43.

[3]苗明三,朱飞鹏.常用医药研究动物模型[M].北 京:人民卫生出版社,2007:90.

[4]Birthelmer A , Stemmelin J , Jackisch R , et al . Presynaptic modulation of acetylcholine ,noradrenaline , and serotonin release in the hippocampus of aged rats with various levels of memory impairments[J].B rai n Res B ull , 2003 , 60 (3) : 2832296.

[5]Tanaka K,Wada N, Ogawa N. Chronic cerebral hypoperfusion induces transient reversible monoaminergic changes in the rat brain[J].Neurochem Res, 2000, 25 (2) : 313.


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