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发酵工程与设备实验试题答案


发酵工程与设备实验
1. 决定摇瓶溶氧量的因素有哪些?它们如何影响摇瓶溶氧量? 答:⑴摇瓶的透气性:8 层纱布,纱布透气性越好,摇瓶溶氧量 越大。⑵摇瓶的转速:转速越大,培养基流动越剧烈,增大与气 体接触面积。⑶培养基的粘稠度:粘稠度越大,氧气越难进入, 溶氧量越低。 2. 采用磷钼蓝法测定发酵液中的植酸酶活性实验中,空白对照 中并未发生酶和底物的水解反应,但经过显示后,颜色却呈较深 的蓝色,试解释其原因。 答:①磷钼蓝受热,易被氧化成蓝色还原物。②植酸钠中含杂质 磷太多。 3. 红曲米发酵实验中,为何要添加酸水?无菌酸水如何制得? 答:是为了洗脱菌种,同时为红曲霉生长创造酸性环境。 制备:取一烧杯的蒸馏水,往水中加入乳酸并调 PH 至 4.0.然后 取 10ml 配制好的溶液于干净的试管中,密封包扎后,放入高压 灭菌锅灭菌,即可得到无菌酸水。 4. 产植酸酶黑曲霉的分离实验中,为何选用植酸钙而不选用植 酸钠? 答:钠盐易溶解、钙盐难容,易形成透明圈,从而筛选。 5. 产植酸酶黑曲霉的分离实验中,为什么不将脱氧胆酸钠溶液

和氯霉素眼药水加入到筛选培养基中一起灭菌? 答:①脱氧胆酸钠会与铁盐高温时反应。②细菌性抗生素、自身 就是杀菌的,且本身无菌,也不能灭菌。 6. 请详细说明产植酸酶黑曲霉的分离实验的实验原理。 答:以植酸钙为唯一磷来源的选择培养基,同时以透明圈法,从 土壤中分离筛选产植酸酶的黑曲霉 7. 产植酸酶黑曲霉的摇瓶发酵实验中,摇瓶的作用有哪些? 答: ①气体和营养分布均匀②温度保持恒定③代谢产物分散④避 免影响其他菌丝生长⑤防止细胞沉淀 8. 植酸酶酶活力测定实验中,若显色后的反应体系测定吸光度 值为 2.23,说明什么问题?该如何调整实验方案? 答:浓度过大,该稀释。 9. 植酸酶活力测定时做标线的目的是什么? 答:标线是反应吸光度与无机磷浓度之间的关系,待我们测的样 品吸光度后即可在标线上读出对应无机磷浓度, 从而进行酶活计 算。 10.简述灭菌锅的使用方法及步骤。 答:①向锅内注入水至三脚架上边缘、预热。 ②放入物品,将直排气管并放入排气槽。 ③关盖,拧紧对应螺栓,打开开关加热 ④待压力达到 0.05MPa,排冷空气,归零。

⑤使温度在 121~126℃,20~30min,打开排气阀,自然 归零,开盖,取出物品存用。 11.试述试管棉塞的详细制作步骤。 答: ①剪方形纱布②取方形棉花③对折棉花④紧卷棉花⑤纱布包 紧⑥塞入试管并整理⑦扎线⑧去残角 12.试述锥形瓶棉塞的详细制作步骤。 答: ①取适量棉花②对折③紧卷④取适当大小方形纱布⑤包紧⑥ 塞入锥形瓶并整理⑦将纱布对角,残角塞入纱布内 13.试述发酵瓶棉塞的详细制作步骤。 答:取 8 层纱布(取一张对折三次)→塞在瓶口内→整理纱布, 使纱布与瓶壁接触处无折痕即可 14.试述平板菌落接种试管斜面的详细步骤。 答:工具、手、试管斜面、平板、工作台等消毒→点燃酒精灯, 再消毒手,在酒精灯附近打开平板和试管塞→用接种环在平板上 取一环菌丝接种到斜面上,盖上平板,塞上试管塞 15.试述摇瓶种子接种发酵瓶的详细步骤。 答:工具、手、试管斜面、平板、工作台等消毒→点燃酒精灯, 再消毒手,在酒精灯附近打开瓶塞→用移液管从种子瓶量取适量 菌液接种到发酵瓶中→盖上瓶盖 16.试述红曲斜面孢子种接至三角瓶的详细步骤。 答:工具、手、试管斜面、平板、工作台等消毒→点燃酒精灯,

再消毒手,在酒精灯附近打开无菌水试管塞和斜面试管塞→把无 菌水加入斜面中,盖上塞子,震荡→在酒精灯旁打开药瓶塞和斜 面塞→用移液管从斜面上吸取适量孢子液,注入摇瓶中→盖上塞 子 17.植酸酶酶活力测定实验中,样品管与空白管的加样顺序有何 不同?为什么不同? 答:TCA 和植酸钠顺序相反。①保证加样相同 中酶液与底物反应。 18.植酸酶酶活力测定实验中,Vc、植酸钠和 TCA 的作用各是什 么? 答:Vc:强还原剂,显色液成分之一。植酸钠:酶反应的底物。 TCA:酶失活剂 19.所培养的平板有没有可能得不到菌落?试分析得不到菌落的 原因及措施。 答:有可能。①样品富集②取稀释倍数低的稀释液③人为原因引 起的可重新培养平板 20.产植酸酶黑曲霉的分离实验中, 平板中为什么要加入 1%脱氧 胆酸钠溶液? 答:抑制真菌菌落菌丝生长速度,防止连成一片,有利得到单菌 落。 21.产植酸酶黑曲霉的分离实验中,氯霉素注射液或氯霉素眼药 ②避免空白管

水为何不需要灭菌,加入有何作用? 答: 细菌性抗生素、 自身就是杀菌的, 且本身无菌, 也不能灭菌。 作用:抑制杂菌生长 22.产植酸酶黑曲霉的分离实验中,经过一次分离的菌种是否为 纯种?若不纯,应采用那种分离方法最合适? 答: 多半不是, 进行多次纯化, 不断进行分离, 可采用划线培养。 23.简述黑曲霉纯种培养操作过程中的关键无菌操作技术。 答:①操作在酒精灯附近②灼烧接种环,靠壁冷却③管口对准酒 精灯和接种环④灼烧试管口⑤动作要迅速 24.试举例说明摇瓶培养技术的应用。 答:摇瓶培养 Cc168 鸡腿菌,周期短,产量高,成本低,污染 少。 25.红曲米固态发酵中,为什么每天要将三角瓶摇动 2~3 次? 答:①充分混匀菌体,充分发酵②温度,不致局部过热影响发酵 ③放出底部 CO?,使 O?充分接触 26.酸奶制做实验中,如何判断主发酵是否完成? 答:通过乳酸菌发酵牛奶的乳糖产生乳酸,乳酸使牛奶中的酪蛋 白(占乳蛋白 85%)变性凝固而使整个奶液呈凝乳状态。同时, 可形成酸奶特有的香味和风味。 27.酸奶制作的基本原理是什么? 答:①凝固②PH 检测

28.常用的酸奶发酵菌种有哪些?(写 3~5 种) 答: ①保加利亚乳杆菌②嗜热链球菌③双歧乳杆菌④嗜酸乳杆菌 29.植酸酶酶活力测定实验中,空白管和样品管的加样顺序有何 不同?为什么? 答:TCA 和植酸钠顺序相反。①保证加样相同 中酶液与底物反应。 30.酿制糯米甜酒的酒药中主要含何种微生物?糯米甜酒的发酵 原理是什么? ②避免空白管

答:根霉。

米饭(淀粉)

→上面是淀粉酶,下面根霉。可发酵性糖→上面酒化,下面根霉/ 酵母。酒→上面后熟。香酒 31.为什么糯米饭要降温至 35℃以下拌酒曲?为什么糯米饭一开 始发酵时要挖个洞?后来为什么又要填平? 答:温度一般为菌种生长的速度,依菌种而定。挖洞:①充分与 O?接触②观察 4/5 时转入发酵,发酵为压氧,故填平。 32.为什么刚酿制的甜酒往往略带酸味?经低温存放后则酸味消 失,香味更浓郁,试解释其中原因。 答:微生物自身代谢产生有机酸。后熟原理:有机酸与生成的乙 醇酯化反应成脂类物质,具有香味 33.红曲米色价测定实验中,萃取后的米粒中仍带有红色,是否

对结果产生影响?为什么? 答:无影响。浸泡一定时间,会达到一个平衡点,带有红色是正 常的,色价定义是 1 克样品 60℃水浴 2h 后的醇溶性色素在 505nm 处的吸光度值。


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