tceic.com
简单学习网 让学习变简单
相关标签
当前位置:首页 >> 其它课程 >>

2011 发酵工程习题学生(有答案)


发酵工程复习题 一、填空 1、 我国白酒的分类方法多样, 其中以香型分类为常用,一般认为白酒可分为四种,即浓 香 型酒, 以泸洲老窖 (酒) 为代表; 香型, 酱 以茅台 (酒) 为代表; 香型, 清 以五粮液 (酒) 为代表;米香型香型,以桂林三花酒 (酒)为代表。 2、我国传统酿造常用到曲,种曲作用是 提供大量的孢子,而曲通常用来提供 大量的菌体 或酶 。 4、一般酒精度低于

16 度的饮料酒均须后杀菌,一般采用巴氏消毒 法。 6、发酵生产按生产操作工艺分类,可分为 连续、分批、流加三种。 7、通用发酵罐通常由空气系统 、 温度系统 、 蒸汽系统 等几个重要系统组成。 8、在工业发酵中,10 吨以下小型发酵罐一般以 夹套 式装臵控温,10 吨以上的大中型发 酵罐一般以 盘管 式装臵控温。 9、在工业发酵过程中,与代谢变化有关的物理参数主要有: 罐压、温度 、溶氧 、搅拌、 发酵液表观粘度等,生物参数主要有:菌体形态 、菌体比生长速率 等。 10、发酵生产中试车间常用的接种方法主要有 压差 和火圈接种 两种。 11、一般来说,发酵工业的生产过程主要包括以下环节:原料预处理;培养基配制;发酵 设备和培养基灭菌;无菌空气的制奋;微生物菌种制备和扩大培养;发酵;发酵产品的分 离和纯化。 12、发酵工业根据操作方式不同可分为三种模式,即间歇发酵、连续发酵和流加发酵。常 见的间歇发酵,也称分批发酵。 13、1956年,日本木下祝郎发明了代谢控制发酵技术,使谷氨酸发酵生产实现产业化。 14、发酵工业的发展经历了天然发酵阶段、纯培养技术的建立、通气搅拌发酵技术的建立、 代谢控制发酵和现代发酵工程技术的发展四个时期。 15、1929 年,英国科学家弗莱明发现了青霉菌,1940 年英国弗洛里和钱恩分离出青霉素, 1941 年英美两国合作对青霉素开发研究,1942 年实现了青霉素工业化生产。 16、发酵工程技术服务的领域包括食品工业、医药工业、化学工业、能源开发以及环境治 理等。 17、发酵工业以微生物的生命活动为基础,决定发酵工业生产水平的三个要素:生产菌种 的性能、发酵及提纯工艺条件和生产设备,其中优良的菌种是最重要的。 18、工业微生物具有个体小、种类多、繁殖快、分布广、代谢能力强、易变异改造等特点。 19、工业微生物包括细菌、放线菌、酵母菌和霉菌,在某种意义上还包括病毒。 20、菌种保藏方法有传代培养保藏法、液体石蜡覆盖保藏法、载体保藏法、寄主保藏法、 冷冻保藏法、冷冻干燥保藏法等。 21、种子扩大培养的方法有表面培养法、固体培养法、液体深层培养法和载体培养法。 22、影响种子质量的因素有培养基、种龄与接种量、培养温度和湿度、pH、通风和搅拌、 泡沫、染菌的控制、种子罐级数的决定。 23、种子异常表现为菌种生长发育缓慢或过快、菌丝结团、菌丝粘壁。 24、葡萄糖的分解途径有:EMP 途径,HMP 途径,ED 途径,PK 途径等四种。 24、根据采用水解催化剂不同,淀粉水解糖的制备有酸水解法、酶水解法和酸酶结合水解 法 3 种方法。 25、发酵生产中,往往需要对培养基及其发酵设备进行灭菌,一般工业上常采用蒸汽湿热 灭菌。 26、根据生物作用剂的不同,生物反应器分为酶催化反应器、细胞反应器;根据生产菌种 和发酵条件的要求,生物反应器分为好氧生物反应器、厌氧生物反应器、光照生物器、膜 生物反应器。 27、标准发酵罐的几何尺寸高径比=1.7-4。 28、自吸式发酵罐是一种不需要空气压缩机,而在搅拌过程中自吸入空气的发酵罐。 29、发酵工业所采用的灭菌方法主要有:干热灭菌法、湿热灭菌法、射线灭菌法、化学灭 菌法、过滤除菌法等,需要根据灭菌的对象的要求进行选用。 21、空气灭菌的方法有热灭菌法、辐射灭菌法、静电除菌、介质过滤除菌法。 22、在实验室和小规模发酵培养过程中,氧的供给可以通过摇瓶机的往复或偏心旋转运动 对摇瓶中的微生物供氧。对大规模生产的深层发酵罐供氧采用通风方式通入无菌空气,为

了提高供氧效率,还必须控制搅拌速率。 23、微生物积累某种产物,取决于微生物遗传性状和环境条件,要控制微生物发酵的方向 和质量,首先要研究微生物的生理代谢规律。 25、甲烷发酵是由许多厌氧细菌同时进行的产酸和产气的复合发酵。甲烷菌与真细菌的一 个主要区别在于它能抵抗破坏真细菌细胞壁的抗生素的作用。 26、发酵动力学描述采用群体生物量的变化来表示,研究微生物发酵过程中菌体生长、基 质消耗、产物生成的动态平衡及其内在规律。 27、生物反应器设计的主要目标是获取高质量、低成本的产品。而做到低成本的一个重要 因素是增效节能。生物反应器设计和操作的限制因素主要是传质和传热。 28、按微生物对氧的需求,发酵罐可分为厌氧发酵罐和好氧发酵罐。前者在工业生产主要 用于啤酒和酒精的生产;后者分为机械搅拌式、气升式和自吸式发酵罐,以机械搅拌通风 发酵罐占主导地位,多用于氨基酸、抗生素、酶制剂等的生产。 29、发酵罐的放大方法主要有经验放大法、因次分析法、数学模拟法等。 30、除菌种外,影响发酵过程的因素有培养基组成、温度、氧的供给、pH、泡沫、补料、 CO2 浓度和呼吸商等。 31、发酵热包括生物热、搅拌热、蒸发热和辐射热等,是引起发酵过程中温度变化的原因。 32、发酵工业是 COD 排放大户,其中柠檬酸和味精污染最严重,是我国要严格控制的重点 行业。 33、发酵废物资源化,可生产单细胞蛋白、酒精、生物柴油、氢能、燃料乙醇、沼气等。 34、发酵废物资源化发展趋势,表现在规模化和商品化、多元化与多极化、高效化和洁净 化、规范化与法制化。 35、发酵工业废水有好氧处理和厌氧处理,前者有活性污泥法、生物膜法;后者有普通消 化法、厌氧接触法、升流式厌氧污泥层反应器、厌氧膨胀颗粒污泥床反应器、内循环式反 应器、厌氧附着膨胀床反应器、厌氧流化床反应器、厌氧生物滤池、两相厌氧消化工艺等。 36、固体废物和废水的无害化处理是将干扰废物通过工程处理,达到不损害人体健康,不 污染周围自然环境的程度。我国废弃物和废水的控制与处理正在从“无害化”、 “减量化” 向着“资源化”发展。 37、研究发酵动力学可以进行最佳发酵生产工艺条件的控制,还为工厂的试验比拟放大, 为分批发酵过渡到连续发酵提供理论。设计合理的发酵过程,必须以发酵动力学模型作为 依据。 38、纤维素预处理的方法有物理法、化学法、物理化学法和生物法。实际中往往采用各种 不同的组合方法,常见的有先采用机械破碎,然后采用爆破、化学或生物的方法进行处理, 可显著提高纤维素的水解效率。 39、补糖的时机不能单纯以培养时间作为依据,还要根据基础培养基中碳源种类、用量和 消耗速度、前期发酵条件、菌种特性和种子质量等因素判断。因此,根据代谢变化来考虑, 比较切合实际。 40、由于各种发酵的菌种、培养基、发酵条件、发酵周期以及产物性质等不同,杂菌污染 对其造成的危害程度也不同。 41、发酵染菌后的异常现象是指由于发酵染菌导致发酵过程中的某些物理参数、化学参数 或生物参数发生与原有规律不同的改变,主要表现在:菌体浓度异常、pH 过高或过低、溶 解氧及 CO2 水平异常、泡沫过多、代谢异常。 42、绝大多数微生物都能利用葡萄糖作为能源和碳源。因此,葡萄糖的分解代谢、能量转 化规律,具有生物学意义。糖代谢的调节主要是能荷的控制,就是受细胞内能量水平的控 制。 43、生物反应器应提供适宜生物体生长和产物形成的各种条件,促进微生物的代谢,达到 低能耗、高产量的目的。同时还应满足无菌的要求。另外反应器的结构应尽量简单,便于 清洗和灭菌。 44、在分批培养过程中,随着微生物生长和繁殖,细胞量、底物、代谢产物的浓度等均不 断发生变化。微生物的生长可分为四个阶段:延滞期、对数生长期、稳定期和衰亡期。 45、种子罐的级数是指制备种子需要逐级扩大培养的次数,它决定于生产所用菌种的生长 特性、孢子发芽及菌体繁殖的速度、所用发酵罐的体积。工业生产中,谷氨酸采用二级发 酵,青霉素采用三级发酵。

46、接种量是指移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例。接种量的大小决定于生产 菌种在发酵罐中生长繁殖的速度。一般按 1-10%量接种。 47、种子扩大培养的方法有表面培养法、固体培养法、液体深层培养法、载体培养法。 48、种子质量的最终指标是考察其在发酵罐中所表现出来的生产能力。发酵工业常用的判 断种子质量的标准有:细胞或菌体、生化指标、产物生成、酶活力。 49、发酵工业用原料通常以糖质或淀粉等碳水化合物为主,加入少量有机氮源和无机氮源, 只要不含毒物,一般无精制的必要,微生物本身能有选择地摄取所需要的物质。培养基成 分中除碳源、氮源、无机盐、生长因子和水等五类营养成分外,还要有前体、促进剂和抑 制剂等物质。 50、根据微生物对营养源中碳源、能源需求的不同,微生物营养类型可以分成光能自养、 光能异养、化能自养和化能异养 4 种类型。 51. 工业发酵的发展经历了以下几个阶段:(天然发酵阶段、纯培养技术的建立、通气搅 拌发酵技术的建立、代谢控制发酵技术的建立、开拓新型发酵原料时期、基因工程段。) 52. 根据不同的分类原则,工业发酵可分为若干类型。如按发酵形式来区分,有(传统工 艺发酵)和(现代工业发酵);按发酵培养基的物理性状来区分,有(固态发酵)、(半 固态发酵)和(液态发酵);按发酵工艺流程来区分,有(分批式发酵)、(连续式发酵) 和(流加式发酵);按发酵过程中对氧的不同需求来区分,有(厌氧发酵)和(需氧发酵)。 53. 发酵工业上常用的微生物有细菌(如枯草芽孢杆菌、醋酸杆菌、棒状杆菌、乳酸菌、 状芽孢杆菌)、酵母菌、霉菌(如根霉、曲霉)和放线菌四大类群。 54. 微生物群体的生长过程,大致可划分为4个阶段:(延滞期、对数期、稳定期和衰亡 期)。 55. 微生物生长所需的基本营养物质有(碳源、氮源、无机盐类、生长因子和水分)。 56. 发酵工业生产中的碳源主要是(糖类)和(淀粉),如(葡萄糖、玉米、大米、大麦、 高梁、麸皮)等。氮源主要是(玉米浆、花生饼粉)等有机氮源,也有(尿素、硫酸铵、 硝酸铵)等无机氮液。 57. 筛选新菌种的具体步骤大体可分为(采样、增殖培养、纯种分离、发酵试验、性能测 定)等。 58. 菌种的选育方法常用的有(新菌种的分离与筛选)、 (诱变育种)和(基因重组育种)。 59. 常见的菌种保藏方法有:(斜面转接保藏法)、(液体石蜡保藏法)、(砂土管保藏 法)、(冷冻干燥保藏法)和(液氮保藏法)。 60.培养基的种类繁多,一般可根据其营养物质的不同来源分为(合成培养基)、(天然培 养基)和(半合成培养基),根据培养基的不同用途分为(基础培养基)、 (增殖培养基)、 (鉴别培养基)和(选择培养基);根据培养基的物理状态的不同分为(固体培养基)、 (半固体培养基)和(液体培养基)。在工业发酵中,依据生产流程和作用的不同分为(斜 面培养基)、(种子培养基)以及(发酵培养基)。 61.灭菌是指(完全杀死所有微生物包括繁殖体和芽孢的方法);消毒是指(杀死一药有害 健康的致病微生物)。 62.发酵生产中常用的除菌方法有(高压蒸汽灭菌法)、(巴斯德消毒法)、(空气过滤除 菌法)、(辐射灭菌法)和(化学试剂消毒)等。 63.化学消毒剂指 (凡是可以杀死致病菌或其他有害的微生物的化学药品),如(高锰酸钾、 酒精)等。防腐剂是指(凡能抑制微生物活动的药剂),如(苯甲酸钠)等。 64.发酵生产中,染菌的原因或途径主要有以下几个方面: (种子染菌)、 (灭菌不彻底)、 (空气带菌)、(设备渗漏)、(操作不合理以及管理不善)等。 65.在整修发酵过程中,微生物将培养基的营养成份用于 3 个方面:一部分(用于构成微生 物细胞);一部分(被分解生成 CO2,并获得能量);此外,?(还用于产生各种代谢产物)。 66.目前,对工业发酵过程监控的指标主要包括物理、化学和生物指标。物理检测指标包括 (温度、压力、搅拌速度、功耗、泡沫、空气流量、粘度)等;化学检测指标包括(PH、 氧化还原电位、溶解氧、气体 CO2、气体 O2、糖含量、?酒精含量、氮化合物含量)等;生 物检测指标包括(菌体浓度、ATP、各种酶活力、中间代谢产物)等。 67.一般监控系统包括(测定元件、控制部分)和(执行元件)三个部分。

68.发酵生产中,一般以(通风比)来表示空气流量,通常它是以(一分钟内通过单位体积 培养液的空气体积比)来表示的。例如,装有 10m3 培养液的发酵罐,容每分种通入无菌空 气 4m3,由通风比为 0.4:1(或 0.4)。 69.过滤是发酵产物后处理中最常用的一种分离方法。它是(利用多孔介质阻留固体而让液 体通过,使固体和液体分离)的方法。常用的过滤设备有(板框式压滤机)、(硅藻土过 滤机)。 70. 蒸馏是(利用混合物中各组分的挥发度不同而加以分离提取)的方法。酒类产品中采 用蒸馏法提取的有(酒精)、(白酒)。 71.发酵工程发展过程中的三个转折点依次是(纯培养技术的建立)、(深层培养技术的建 立)、(代谢控制发酵技术的建立)。 72.在啤酒酿造过程中起主要作用的酒花成分有(α-酸)、(β-酸)、(酒花油)、(多 酚物质)。 73.利用微生物发酵生产核苷酸类物质的方法有以下三种,(直接发酵法)、(分解法)、 (添加前体法)。 74.利用微生物生产 SCP 的优点有 (生长繁殖迅速) (营养价值高) (原材料来源广泛) 、 、 。 75.液态白酒增香的方法主要有(固液结合法)、(调香法)、(全液态法)。 76.在葡萄酒酿造过程中 SO2 的作用是(杀菌)、(溶菌)、(澄清)、(增酸)、(抗氧 化)。 77. 代谢控制的两种方法 酶活性调节 , 酶合成的调节 。微生物的代谢调节有酶合成 的调节和酶活性的调节。这两种调节方式的主要区别是:一种是调节酶的种类,一种是调 节酶的量。 78.在发酵生产中,为使延滞期缩短,可采取处于快速生长繁殖中的健壮菌种细胞接种 、 适当增加接种量 、 培养种子与下一步培养用的两种培养基的营养养成分以及培养的 其它理化条件尽可能保持一致 等措施。 79.用红外和顺磁氧分析仪可以分别测定 CO2、CO 和 微量氧 含量。 80.HMP 途径的重要性在于 提供大量 NADPH 与 各种不同碳原子骨架的磷酸糖 。 81.青霉素生物合成主要涉及两种酶 环化酶 和 扩环酶。 82.链霉素的分子结构由 链霉胍 、 链霉糖 和 N-甲基-L 氨基葡萄糖 组成。 83.赖氨酸生物合成有两条途径:通常细菌走糖酵解途径途径;真菌走 a-氨基己二酸 途 径。 84.发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和 产品的分离提纯。√ 85.由两个因素决定细胞得率 和 。 86.EMP、HMP、ED 和 PK 途径的关键酶分别为 1,6-二磷酸果糖醛缩酶 、 转酮-转醛酶 系 、 2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖醛缩酶 和磷酸酮解酶 。 综合填空题 87.乙醇等 “绿色能源” 的开发备受世界的关注。 利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为:
玉米秸秆 预处理、水解 糖液 发酵 酒精

(1)玉米秸秆经预处理后,应该选用纤维素酶进行水解,使之转化为发酵所需的葡萄糖。 (2)从以下那些微生物中可以提取上述酶 ( B、E)多选题 A.酶制果醋的醋酸菌 B.生长在腐木上的霉菌 C.制作酸奶的乳酸菌 D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌 E.反刍动物瘤胃中生存的某些微生物 (3) 若从土壤中分离产生这种微生物,所需要的培养基为选择培养基(按功能分) ,培养 基中的碳源为纤维素 (4)从生物体提取的酶首先要检测酶的活力,以便更好的将酶用于生产实践。在生产糖液 的过程中,为了使酶能够被反复利用,可采用固定化酶技术 (5)发酵阶段需要的菌种是酵母菌,砸死产生酒精时要控制的必要条件是无氧 88. 发酵工程在工业生产上得到广泛应用,其生产流程如下图所示。结合赖氨酸或谷氨酸 的实际生产,回答有关问题。

基因工程

分 从 离 自 菌 然 种 界

接种
细胞工程 生产用菌种

扩大培养

发酵罐





赖 氨 酸 或 谷 氨 酸

(1)人工控制微生物代谢的措施包括改变微生物的遗传特性和控制生产过程中的各种条 件。目前采用的是诱变育种,已经选育出不能合成高丝氨酸脱氢酶系的黄色短杆菌新菌种 (2)在发酵过程中,产物源源不断的产生。这说明赖氨酸好哦谷氨酸的生产采用了连续培 养的发酵方法。在生产过程中,由于谷氨酸或赖氨酸的发酵菌种为好氧型的,常需要增加 通气量。当发酵生产的产品是谢产物时,还要采用萃取或蒸馏。离子交换等分离提纯的方 法进行提取。 89. 发酵法生产酒精后的废液(pH=4.3)含有大量有机物,可用于培养获得白地霉菌体, 生产高蛋白饲料。培养,制取白地霉菌体的实验过程示意图如 废液经沉淀处理 废液上清液 定量分装若干瓶
白地霉 菌种

滤纸 过滤



甲 50ml 乙 50ml 丙 100ml 丁 1000ml



烘干、称量

均在 30-32℃条件下震荡培养适当时间 (1)实验过程中培养白地霉的培养基是液体培养基。培养基分装前,先调 pH ,分装后 用棉塞封瓶口,最后灭菌处理。 (2)图中 1 过程称为接种,从甲到丁的培养过程是扩大培养白地霉的代谢类型为异氧需 氧型。 (3)在确定菌体产量, 图中 2 操作之前,应先称量滤纸的质量。过滤之后需反复烘干称量, 直至恒重。所获菌体干重等于恒重的质量与滤纸的质量之差。 90. 腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经微生物发酵的大豆产品。下面是腐乳制作的 流程示意图
让豆腐上 长出毛霉 加 盐 腌制 加卤汤 装瓶 密 封 腌制

(1)现代科学研究表明,许多种微生物参与了豆腐的发酵,比如 青霉,曲霉,酵母和毛 霉等。其中期主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌,分布广泛,常见于土壤,水果, 蔬菜,谷物上。毛霉生长迅速,具发达的白色菌丝。 (2)腐乳制作的原理是微生物发酵。 (3)传统的制作过程中,豆腐块上的生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子。而现代的腐乳生 产是在严格的无菌条件下,将优良的毛霉菌种接种在豆腐上,这样可以避免其他菌种的污 染,保证产品的质量。 (4)加盐的目的是析出豆腐的水分,使豆腐变硬和抑制微生物的生长,避免豆腐变质 (5)卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的,卤汤中的酒可以选用料酒,黄酒,米酒,高粱 酒等,含量一般控制在 12%左右。加酒的作用可以抑制微生物的生长和能使腐乳具有独特 的香味。

91.胰岛素是治疗糖尿病的特效药,可从动物胰腺中提取,也可以通过“工程菌”产生, 后者与前者比较最显著的特点是: 生产条件温和 ;原料来源丰富 ;价格低廉 ;产物专一; 废弃物对环境污染小且易处理 。 92.家庭酿造甜米酒的具体操作过程:先将米加热煮至七成熟,待冷却至 30 度,加少许的 水和一定量的 “酒药” (实际是酵母菌菌种) 与米饭混合后臵于一瓷坛内 (其他容器也可) , 在米饭中央挖一个小洞,加盖后臵于适当地方保温(28℃),12 小时后即可。请从以下几 个方面对发酵过程做一简单的分析。 1) 先将米煮一煮的目的是主要为了杀灭其他杂菌 。 2) 为什么要冷却到 30℃后才能加入“酒药”?太高的温度会杀死或抑制酵母菌 。 3) 在中央挖一个小洞的原因是有利于透气,可保证酵母菌在开始生长时有足够的氧 气,短时间内迅速繁殖;。 4) 发酵坛并没有完全密封,坛内无氧发酵的环境是如何形成的? 有氧呼吸消耗了氧气;呼吸产生的水使发酵液增多,淹没了米饭,形成了无氧环境 。 5) 家庭酿酒的关键是保温和放“酒药”,如果米的量很多而放的“酒药”太少,常常 导致甜米酒因变质而失败。其主要原因是 米多酒药少,造成酵母菌起始密度太低,不能迅 速繁殖形成生长优势,往往导致杂菌感染 93.关于基因工程, 1) 提取目的基因: 采用的方法是根据正常人的胰岛素的 氨基酸 序列, 推测出 mRNA 的 序列,再根据碱基互补配对原则 原则,推测出 胰岛素基因 序列,用化学的方法,合成 目的基因。 2) 目的基因与运载体结合:从大肠杆菌的细胞中提取 质粒 ,并用 限制性内切酶酶切 割质粒, 使其露出粘性末端 。 用同一种酶切割目的基因使其露出相同的 粘性末端, 再将 目 的基因 插入到质粒切口处, 加入适量的 DNA 连接酶酶, 这样就形成了一个 胰岛素基因 和 大肠杆菌质粒 的重组DNA。 3) 将目的基因导入受体细胞:将大肠杆菌用 CaCl2 处理,以增大 细胞壁 的通透 性,让重组DNA进入大肠杆菌体内。 4) 目的基因的检测与表达:在用一定的方法检测出目的基因已导入大肠杆菌细胞内并 能 正常表达 后,再对该种大肠杆菌扩大培养。 5) 配制适合大肠杆菌的培养基,并对培养基进行 灭菌 处理并装入发酵罐,将上述大 肠杆菌接种到发酵罐发酵,并控制 发酵 条件。 6) 发酵完毕后,从培养基中 提取 并 分离 胰岛素,经过一定的加工成为药用胰岛 素,经 检验 合格后,可投入使用。 94.培养蘑菇时常使用的原料为棉花壳、花生粉饼、朽木等,再喷洒适量的水,加入一定 量的尿素等。请回答下列问题。 1) 按化学成分分类,该培养基为天然培养基;按物理性质分类,该培养基为固体培养 基。 2) 培养过程中发现培养基上长出了其他菌, 经鉴定为细菌, 细菌与蘑菇的关系为竞争, 在培养基上施用适量的青霉素即可抑制细菌生长。 3) 蘑菇的代谢类型为异养需氧型,在生态系统的成分中属于分解者。 95.据下图回答问题:

1) 图为微生物的连续培养装臵。其目的是延长稳定期,提高代谢产物产量。为此需创 造微生物生长繁殖的条件,主要做法是:以一定速度不断添加新的培养基。同时又以同样 的速度不断放出老的培养基 。 2) 对加入的[3]要求是无菌,意义是增加溶氧。 3) 在横线上填写名称:[1]新鲜培养基[2]无菌空气[3]无菌空气[4]流出物 二、判断题

(√)1. 酵母菌属厌氧菌,因此须提供厌氧条件才能使发酵彻底。 (√)2. 种子接种时间应掌握在菌体生长对数期的后期。 (√)3. 发酵罐的搅拌器分平叶式、弯叶式、箭叶式三种。
(×)4. 对于实验室和小规模发酵与大规模生产的深层发酵,氧的供给均采用通风方式通入无菌空气。

1、在现代生物技术领域,生物反应器指的是用于发酵生产、实现在线智能控制的反应罐等 钢铁设备。 × 2、酵母菌属厌氧菌,因此须提供厌氧条件才能使发酵彻底。 × 3、葡萄酒生产中添加 SO2 使发酵提前,酵母繁殖和糖的转化加速。 × 4、种子接种时间应掌握在菌体生长对数期的后期。 √ 5、啤酒主体风味是在后酵阶段形成的。 × 6、1944 年,世界上第二个抗生素-链霉素诞生。 √ 3、发酵罐的搅拌器分平叶式、弯叶式、箭叶式三种。 √ 4、发酵罐的搅拌器,国外多用平叶,我国多用弯叶。 √ 5、气流干燥的特点是:热效率高、热损失少、设备复杂,操作困难,投资比其他干燥方法 较大。 × 6、过滤介质只有过滤作用。 × 7、过滤介质除过滤作用外,还是滤饼的支撑物。 √ 8、生物技术是应用自然科学及工程学原理,依靠微生物、动植物体作为反应器将物料进行 加工以提供产品来为社会服务的技术。 √ 9、通气搅拌罐的特点是拌功率消耗大,容易清洗干净。 × 10、超临界流体的特点是密度接近气体,而粘度接近液体。 × 11、对韧性物料剪切力作用较好;对方向性物料则劈碎较好。 √ 12、任何一种粉碎机,都是几种方法的结合,这样最有效。 √ 13、气流干燥的特点是:热效率高、热损失少、设备复杂。 × 14、种子罐的级数越少越有利于简化工艺和便于控制,并可减少多次移种带来的染菌机会。 因此,在发酵工业中实行一级发酵即行。 × 15、微生物发酵机理是指微生物通过其代谢活动,利用基质合成人们所需要的产物的内在 规律。 √ 16、微生物的代谢途径一般是单一的,某特定的代谢途径是不变的。 × 17、冷冻干燥会发生浓缩现象,不能保持物料原来的结构。 × 18、采用物理或化学方法进行的消毒,同样达到灭菌的要求。 × 19、一般最常用的灭菌条件是 121℃,20-30 min。 √ 20、所有发酵过程中必须供给适量的无菌空气,才能使菌体生长、繁殖并积累所需要的代 谢产物。 × 21、对于实验室和小规模发酵与大规模生产的深层发酵,氧的供给均采用通风方式通入无 菌空气。 × 22、有机物的沼气发酵是由单一的甲烷菌完成的一步厌氧反应过程。 × 23、目前大多数发酵生产采用纯种培养,要求除生产菌外无其他微生物。随着技术发展, 采取了一系列措施, 避免了发酵过程的染菌现象, 所有发酵工业均可做到无菌生产。 × 24、我国废弃物和废水的控制与处理正在从“无害化”、 “减量化”向着“资源化”发展。 √ 25、人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造。× 26、 环境条件的变化不仅会影响微生物的生长繁殖, 也会影响微生物的代谢途径。 √ ) ( 27、发酵罐中微生物的生长繁殖、代谢产物的形成都与搅拌速度有关。( × ) 28.单细胞蛋白是从微生物细胞中提取出来的。(× ) 29.消毒就是把被处理物表面和内部的全部微生物杀死。( × ) 30.用来固化细菌培养基的多糖是琼脂。( × ) 31.精确定量某些成分而配制的培养基是所有成分的性质和数量已知的培养基, 称为天然培 养基。( × ) 32.字母 SCP 代表单细胞多糖,即一种作为食品的微生物。(×) 33. 微生物的次生代谢产物是主代谢不畅通时,由支路代谢产生的。(×) 34. 营养缺陷型菌株不能在基本培养基上正常生长。(×)

35. 培养基中加入一定量 NaCl 的作用是降低渗透压。(×) 36. 微生物生长量的大小取决于限制性底物的浓度。(×) 37. 菌种退化主要由培养或菌种保藏条件引起的。(×) 38. 生化意义上的发酵作用是厌氧微生物取得能量的一种方式。(×) 39. 同功酶是行使同一功能、结构不同的一组酶。(×) 三、选择题 (C) 1. 利用酵母发酵生产酒精时,投放的适宜原料和在产生酒阶段要控制的必要条件分别 是 A. 玉米粉和有氧; B. 大豆粉和有氧 C. 玉米粉和无氧; D. 大豆粉和 无氧 (D) 2. 下列关于平菇固体培养的操作程序,正确的是 A. 配制牛肉膏蛋白胨培养基,接种,高压蒸气灭菌,培养 B. 配制牛肉膏蛋白胨培养基,高压蒸气灭苗,接种,培养 C. 配制棉予壳培养基,按种,高压蒸气灭菌,培养 D. 配制棉子壳培养基,高压蒸气灭菌,接种,培养 (D) 3. 由于生物技术已渗透入了现在的化学工业中,因此,现代生物化学工程技术的发展 趋势是将尽可能多的工业化学反应过程用( ) 反应器来代替。 A. 动物 B. 植物 C. 微生物 D. 生物 (B) 4. 农作物的秸秆主要由纤维素、半纤维素和木质素三大部分组成,利用生物技术,这 三大物质可以再生为通用化学品,其中半纤维素可以再生为 ( )。 A. 葡萄糖 B. 木糖 C. 酚、苯等物质 D. 蔗糖 (B) 5. 下列不需要利用发酵工程的是 A. 生产单细胞蛋白饲料 B. 通过生物技术培育可移植的皮肤 C. 燃料乙醇 D. 工厂化生产青霉素 (D) 6. 生物技术中的( )是最早涉及环境保护领域的工程技术。 A.基因工程 B.细胞工程 C.酶工程 D.发酵工程 (A) 7. 酶工程和发酵工程是生物技术实现( )的关键环节。 A. 产业化 B. 商品化 C. 社会化 D. 安全化 (A) 8. 在生物技术中,我们把每单位面积上的( )总量,称为生物量。 A. 微生物 B. 植物 C. 动物 D. 生物有机体 (C) 9. 现代发酵工程是( )在培养基中繁殖后代以获得产品的过程。 A.单一菌种 B.两种菌种 C. 多种菌种 D. 混合菌种 (B) 10. 随着人类人口的增长,能源日趋紧张,利用发酵工程生产的( )有可能成为 新能源,能解决能源枯竭的问题。 A. 甲醇 B. 乙醇 C. 丙醇 D. 丁醇 (C) 1. 下列物质中,不能为异养生物作碳源的是( ) A. 蛋白胨 B. 含碳有机物 C.无机物 D. 石油、花生饼 (D) 2. 培养生产青霉素的高产青霉素菌株的方法是( ) A. 细胞工程 B. 基因工程 C 人工诱变 D. 人工诱变和基因工程 (C)5. 以下发酵产品中不属于微生物代谢产物的是 。 A.味精 B.啤酒 C.“人造肉” D.人生长激素 (D) 7. 对谷氨酸发酵的叙述正确的是( ) A. 菌体是异养厌氧型微生物 B. 培养基属于液态的合成培养基 C. 谷氨酸的形成与搅拌速度无关 D. 产物可用离子交换法提取 (D) 8. 关于微生物代谢产物的说法中不正确的是( ) A. 初级代谢产物是微生物生长和繁殖所必须的 B. 次级代谢产物并非是微生物生长和繁殖所必须的 C. 次级代谢产物在代谢调节下产生 D. 初级代谢产物的合成无需代谢调节 (A) 9. 发酵是利用微生物生产有用代谢产物的一种生产方式,通常说的乳酸发酵属于 A. 厌氧发酵 B. 氨基酸发酵 C. 液体发酵 D. 需氧发酵

1.下列有关谷氨酸棒状杆菌得生长和谷氨酸发酵得叙述,错误的是 ( B ) A. 组成酶是维持菌体基本生活的必要条件 B. 菌体能合成各种生长因子,不需要从外界补充 C. 发酵液 pH 呈酸性时,就会生成乙酰谷氨酰胺 D. 细胞膜透性的改变,可以接触代谢产物对有关酶活性的抑制 2.下图所示为某种培养基的配方,根据表格可以判断出 ( A ) 成分 含量 成分 含量 K2HPO4 2g (NH4)2SO4 1.4 g MgSO4 〃7H2O 0.3g CaCl2 0.3 g 纤维素粉 20g 琼脂 20 g 水 1000ml Ph 5.5 A. 此培养基可以用来筛选生产纤维素酶的菌种 B. 此培养基因原料来源广泛,可用于工业生产 C. 此培养基可以用来筛选自生固氮菌 D. 此培养基中含有微生物所必需的五大营养 3.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。 下列有关一种以 CO2 为唯一碳源的自养微生物 营养的描述中,不正确的是 (B) A. 氮源物质为该微生物提供必要的氮素 B. 碳源物质也是该微生物的能源物质 C. 无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D. 水是该微生物的营养物质 4.通过发酵罐发酵可大规模生产谷氨酸,生产中常用的菌种是好氧的谷氨酸棒状杆菌。下 面有关谷氨酸发酵过程的叙述,正确的是 ( C ) A. 溶氧充足时,发酵液中有乳酸的积累 B. 发酵液中碳源和氮源比例的变化不影响谷氨酸的产量 C. 菌体中谷氨酸的排出,有利于谷氨酸的合成和产量的提高 D. 发酵液 pH 呈碱性,有利于谷氨酸棒状杆菌生成乙酰谷氨酰胺 6.在利用谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的过程中,下列叙述正确的是 ( C ) (1)各个生长期的长短是固定的,无法人为缩短生长周期 (2)对数期是采样留种的最佳时 期 (3)在稳定期补充营养物质可提高产量 (4)调整期是收获代谢产物的最佳时期 A. 12 B. 14 C. 23 D. 34 7 发酵工程的第一各重要工作是从混合的微生物群体中选择优良的单一纯种,获得纯种的 方法不包括 ( C ) A. 根据微生物对碳源需要的差别,使用含不同碳源的培养基 B. 根据微生物缺乏生长因子的种类,在培养基中增减不同的生长因子 C. 利用高温高压消灭不需要的杂菌 D. 根据微生物对抗生素敏感性的差异,在培养基中加入不同的抗生素 8 利用酵母菌发酵生产酒精时,投放的是以原料和在产生酒精阶段要控制的必要条件分别 是( C ) A. 玉米粉和有氧 B. 大豆粉和有氧 C. 玉米粉和无氧 D. 大豆粉和无氧 9 下列有关发酵工程的说法正确的是 ( D ) A. 青霉素是抗生素,在青霉素生产过程中不需要严格灭菌 B. 单细胞蛋白是从微生物细胞中提取出来的 C. 谷氨酸棒状杆菌要在隔绝空气的条件下发酵才能得到谷氨酸 D. 在菌种选育的过程中可以利用人工诱变,细胞工程和基因工程等手段 10 关于单细胞蛋白叙述正确的是 ( B ) A. 是从微生物细胞中提取的蛋白 B. 通过发酵生产的微生物菌体 C. 是微生物细胞分泌的抗生素 D. 单细胞蛋白不能作为食品 11 严格控制发酵条件,是保证发酵正常进行的关键,直接关系到是否能得到质高量多的理 想产物,通常所指的发酵条件控制不包括 ( D) A. 温度条件 B. 溶氧控制 C . pH 控制 D. 酶的控制

12 发酵工程中,能够通过多种途径培养优良品种。其中能定向培育优良菌种的方法是 ( D) A. 人工诱变和基因工程 B. 人工诱变和细胞工程 C. 人工诱变和基因工程,细胞工程 D. 基因工程,细胞工程 13 掌握微生物群体的生长规律,目的是更好的研究和利用它们。下列有关描述中错误的是 ( C ) A. 生产上常常用对数期的细菌作为菌种 B. 在稳定期适当补充营养物质,有利于提高产量 C. 连续培养延长了培养周期,从而提高产量 D. 调整期细菌的代谢活跃,体积增长快 14 在发酵生产中,可根据微生物生物群体的生长规律控制生产过程,在一定的时间内,为 提高次级代谢产物生产率,一般需要 ( C ) A. 缩短稳定期,延长对数期 B. 延长对数期和稳定期 C. 缩短调整期,延长稳定期 D. 延长调整期和衰亡期 15 下列关于微生物代谢和调节的叙述中错误的是 ( D) A. 微生物合成的激素属于次级代谢产物,与自身代谢的调节基本无关 B. 组成酶的合成受基因的控制,而诱导酶的合成还要受环境的制约 C. 处于对数期的细菌代谢旺盛,而大量积累代谢产物是时期是稳定期 D. 酶活性的调节机制是通过代谢产物致使酶的结构发生不可逆变化来实现的 16 下列有关微生物及发酵工程的说法中,正确的是 ( D) A. 分离单细胞蛋白时,通常采用萃取,离子交换等方法 B. 在测定大肠杆菌群体生长规律时,应注意随时调整 ph C. 连续培养的优点是有利于生物尽快将代谢产物释放到培养基中 D. 将大肠杆菌从只用乳糖作碳源的培养基上转移到只用葡萄糖做碳源的培养基上, 其 细胞内半乳糖苷酶合成就会停止 1.用发酵工程生产的产品,如果是菌体,则进行分离提纯可采用的方法是(B) A.蒸馏过滤 C.过滤沉淀 C.萃取离子 D.沉淀萃取 2.下列物质中,不能为异养生物作碳源的是(C) A.蛋白胨 B.含碳有机物 C.含碳无机物 D.石油、花生饼 3.培养生产青霉素的高产青霉素菌株的方法是(C) A.细胞工程 B.基因工程 C.人工诱变 D.人工诱变和 基因工程 4.以下发酵产品中不属于微生物代谢产物的是(C) A.味精 B.啤酒 C.“人造肉” D.人生长激素 5.利用酵母菌发酵生产酒精时,投放的最适原料和产生酒精阶段要控制的必要条件是(C) A.玉米粉和有氧 B.大豆粉和有氧 C.玉米粉和无氧 D.大豆粉和无氧 6.关于单细胞蛋白叙述正确的是(B) A.是微生物细胞中提取的蛋白质 B.通过发酵生产的微生物菌体 C.是微生物细胞分泌的抗生素 D.单细胞蛋白不能作为食品 7.对谷氨酸发酵的叙述正确的是(D ) A.菌体是异养厌氧型微生物 B.培养基属于液态的合成培养基 C.谷氨酸的形成与搅拌速度无关 D.产物可用离子交换法提取 8.用于谷氨酸发酵的培养基需添加的生长因子是( D) A.氨基酸 B.碱基 C.核苷酸 D.生物素 9.关于菌种的选育不正确的是( C) A.自然选育的菌种不经过人工处理 B.诱变育种原理的基础是基因突变 C.通过有性杂交可形成工程细胞 D.采用基因工程的方法可构建工程菌 10.谷氨酸棒状杆菌扩大培养时,培养基应该是(A ) A.C:N 为 4:1 B.C:N 为 3:1 C.隔绝空气 ;D.加大氮源、碳源的比例 11.灭菌的目的是(B ) A.杀灭细菌 B.杀灭杂菌 C.杀灭所有微生物 D.杀灭芽孢 12.能影响发酵过程中温度变化的因素是(D )

A. 微生物分解有机物释放的能量; 机械搅拌 B. C. 发酵罐散热及水分蒸发; B、 D. C 都对 13.在发酵中有关氧的利用正确的是 。 ( B ) A. 微生物可直接利用空气中的氧 B. 微生物只能利用发酵液中溶解氧 C. 温度升高,发酵液中溶解氧增多 D. 需向发酵液中连续补充空气并不断地搅拌 14.当培养基 pH 发生变化时,应该(C ) A.加酸 B.加碱 C.加缓冲液 D.加培养基 15.大量生产酵母菌时,不正确的措施是( A) A.隔绝空气 B.在对数期获得菌种 C.过滤沉淀进行分离 D.使菌体生长长 期处于稳定期 16.基因工程培育的“工程菌”通过发酵工程生产的产品有(B) ①石油②人生长激素③紫草素④聚乙二醇⑤胰岛素⑥重组乙肝疫苗 A.①③⑥ B.②⑤⑥ C.③⑤⑥ D.②③⑤ 17.连续培养酵母菌的措施中不正确的是(D ) A.及时补充营养物质 B.以青霉素杀灭细菌 C.以缓冲液控制 pH 在 5.0~6.0 之间 D.以酒精浓度测定生长状况 18.不能以糖类作为碳源的细菌是(C ) A.假单胞菌 B.乳酸菌 C.甲基营养菌 D.固氮菌 19.不能作为异养微生物碳源的是(D ) A.牛肉膏 B.含碳有机物 C.石油 D.含碳无机物 20.根瘤菌能利用的营养物质的组别是(B ) A.NH3,(CH2O),NaCl B.N2,(CH2O),CaCl2 C.铵盐,CO2,NaCl D.NO2,CO2,CaCl2 21.配制培养基的叙述中正确的是(C ) A.制作固体培养基必须加入琼脂 B.加入青霉素可得到放线菌 C.培养自生固氮菌不需要氮源 D.发酵工程一般用半固体培养基 22.下列属于微生物不可缺少的微量有机物的是( D) ①牛肉膏 ②蛋白胨 ③氨基酸 ④维生素 ⑤碱基 ⑥生物素 A.①②③ B.②③④ C.②③④⑤ D.③④⑤⑥ 23.有关自养微生物的叙述中正确的是(A ) A.NaHCO3 可提供两类营养物质 B.N2 在一般条件下可成为氮 源 C.含 C、H、O、N 的物质可提供碳源、氮源和能源 D.自养微生物需五类营养物 质 24.在用伊红-美蓝培养基鉴别大肠杆菌时,培养基中可以不含有( C) A.碳源;B.氮源;C.生长因子;D.水和无机盐 25.自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是(A ) A.碳源;B.氮源;C.无机盐;D.生长因子 26.下列各项叙述中正确的是(C ) A.微生物的遗传物质都是 DNA B.微生物都属于原核生物 C.微生物的遗传物质是核酸 D.微生物的生殖方式是孢子生殖 27.下列关于生长因子的说法中,不正确的一项是(B ) A.是微生物生长不可缺少的微量有机物 B.是微生物生长不可缺少的微量矿质 元素 C.主要包括维生素、氨基酸和碱基等 D.一般是酶和核酸的组成成分 28.酵母菌培养液中常含有一定浓度的葡萄糖,但当葡萄糖浓度过高时,反而会抑制微生 物的生长,原因是( B) A.碳源供应太充足 B.细胞会发生质壁分离 C.改变了酵母菌的 pH 值 D.葡萄糖不是酵母菌的原料 29.可用于微生物分离鉴定的培养基是(B ) A.固体、天然、选择培养基 B.固体、化学、鉴别培养基 C.半固体、天然、鉴别培养基 D.半固体、天然、选择培养基

30.下列营养物质中,不是同时含有碳源、氮源和生长因子的是(C ) A.牛肉膏 B.蛋白胨;C.生物素 D.酵母粉 31.鉴别培养基是根据微生物的代谢特点在培养基中加入一些物质配制而成,这些物质是 (A ) A.指示剂或化学药品;B.青霉素或琼脂;C.高浓度食盐;D.维生素或指示剂 32.纯培养是其中(A )的培养物。 A 只有一种微生物 B 只有细菌生长所需的一种营养物 C 除主要微生物外只有一种微生物 D 没有代谢废物 33.平板划线分离法需要下面所有的物品,除了(D )之外。 A 接种环;B 琼脂培养基平板; C 细菌的培养物;D 电泳仪 34.鉴别培养基是一种培养基,其中(B )。 A 真菌和病毒生长不同 B 辨别两种不同的细菌 C 有两种不同细菌所用不同的特殊营养物 D 保温培养期采用两种不同的温度 35.代谢过程为了产生 ATP 分子,所有下面的物质都是需要的,除了(D )之外。 A 二磷酸腺苷分子;B 能量;C 磷酸基;D DNA 和 RNA 36.代谢中如发生还原反应时,( C)。 A 从底物分子丢失电子; B 通常获得大量的能量 C 电子加到底物分子上; D 底物分子被氧化 37.当进行糖酵解化学反应时,(D )。 A 糖类转变为蛋白质 B 酶不起作用 C 从二氧化碳分子产生糖类分子 D 从一个单个葡萄糖分子产生两个丙酮酸分子 38.微生物中从糖酵解途径获得( A )ATP 分子。 A 2 个;B 4 个 ;C 36 个;D 38 个 39.下面的叙述( A)可应用于发酵。 A 在无氧条件下发生发酵; B 发酵过程发生时需要 DNA C 发酵的一个产物是淀粉分子; D 发酵可在大多数微生物细胞中发生 40.进入三羧酸循环进一步代谢的化学底物是( C)。 A 乙醇 B 丙酮酸 C 乙酰 CoA D 三磷酸腺苷 41.下面所有特征适合于三羧酸循环,除了(D )之外。 A C02 分子以废物释放; B 循环时形成柠檬酸 C 所有的反应都要酶催化; D 反应导致 葡萄糖合成 42.电子传递链中(A )。 A 氧用作末端受体; B 细胞色素分子不参加电子转移 C 转移的一个可能结果是发酵; D 电子转移的电子来源是 DNA 43.化学渗透假说解释( C)。 A 氨基酸转变为糖类分子;B 糖酵解过程淀粉分子分解为葡萄糖分子 C 捕获的能量在 ATP 分子中;D 用光作为能源合成葡萄糖分子 44.当一个 NADH 分子被代谢和它的电子通过电子传递链传递时,( C)。 A 形成六个氨基酸分子; B 产生一个单个葡萄糖分子 C 合成三个 ATP 分子; D 形成一个甘油三酯和两个甘油二酯 45.己糖单磷酸支路和 ED 途径是进行(C )替换的一个机制。 A 微生物中 DNA 合成; B 光合生物中的光合作用 C 某些种类微生物中的能量代谢; D 化学渗透作用 46.微生物代谢中,硝酸盐和硫酸盐可作为电子受体是在(C )。 A 无酶时;B 无 ATP 时;C 无氧时;D 有细胞色素时 47.为使淀粉和纤维素进行代谢而提供能量,( B) A 它们必须第一步变成脂肪分子; B 它们的葡萄糖单位必须被释放 C 环境中必须有游离氧存在; D 遗传密码必须起促进作用 48.脱氨(基)作用解释这种转变(D )。 A 多糖转变为双糖; B 双糖转变为多糖 C 脂肪转变为糖类分子; D 氨基酸转变为能量化合物 49.为使细胞利用脂肪酸作为它们的能量,脂肪酸分解而且转化成的分子为(B )。

A 醌和磷酸核糖;B 乙酰 CoA;C 各种氨基酸;D DHAP 分子 50.常作为生产菌种和科研材料的细菌群体,应该是代谢旺盛、个体形态和生理特性比较稳 定的。所以应选择在它的(B) A 迟滞期 B 对数期 C 稳定期 D 衰亡期 51.某些放线菌产生的抗生素,是它们的( B ) A 初级代谢产物;B 次级代谢产物; C 代谢中间产物; D 代谢废物 52.固体培养基中需要加入琼脂的目的是(D) A 为菌体提供碳源 B 为菌体提供氮源 C 使培养基保持水分 D 使培养基凝固 53.下列关于发酵工程的说法,错误的是(C) A.发酵工程的产品是指微生物的代谢产物和菌体本身 B.通过人工诱变选育新品种 C.培养基、发酵设备和菌种必须经过严格的灭菌 D.环境条件的变化,不仅会影响菌种的生长繁殖,而且会影响菌体代谢产物的形成 54.微生物代谢的调节属于 ( C) A.神经调节;B.激素调节;C.酶的调节;D.基因调节 55.在培养基的配制过程中,具有如下步骤,其正确顺序为 (B ) ①溶化 ②调 pH ③加棉塞 ④包扎 ⑤培养基的分装 ⑥称量 A.①②⑥⑤③④ B.⑥①②⑤③④ C.⑥①②⑤④③ D.①②⑤④⑥③ 56.通过影响微生物膜的稳定性,从而影响营养物质吸收的因素是( B) A.温度;B. pH ;C.氧含量 ;D.前三者的共同作用 57.发酵是利用微生物生产有用代谢产物的一种生产方式,通常说的乳酸发酵属于( A) A.厌氧发酵 B.氨基酸发酵 C.液体发酵 D.需氧发酵 58.关于微生物代谢产物的说法中不正确的是( D) A.初级代谢产物是微生物生长和繁殖所必须的 B.次级代谢产物并非是微生物生长和繁 殖所必须的 C.次级代谢产物在代谢调节下产生 D.初级代谢产物的合成无需代谢调节 59.某药厂用谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸,结果代谢产物没有谷氨酸而产生乳酸及琥 珀酸,其原因是(D ) A.温度控制不适 B.通气量过多 C. pH 呈酸性 D.溶氧不足 60.下列可用于生产谷氨酸的菌种是(C ) A.谷氨酸棒状杆菌、金黄色葡萄球菌;B.链球菌、大肠杆菌 C.谷氨酸棒状杆菌,黄色短杆菌;D.大肠杆菌、乳酸菌 61.发酵过程中,不会直接引起 pH 变化的是(C ) A.营养物质的消耗;B.微生物呼出的 CO2 C.微生物细胞数目的增加;D.次级代谢 产物的积累 62.关于灭菌和消毒的不正确的理解是( B) A.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B.消毒和灭菌实质上 是相同的 C.接种环用烧灼法灭菌 D.常用灭菌方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药 品法 63.酵母菌培养液常含有一定浓度的葡萄糖,但当葡萄糖浓度过高时,反而抑制微生物的 生长,原因是(B ) A.碳源供应太充足; B.细胞会发生质壁分离 C.改变了酵母菌的浓度;D.葡萄糖不是 酵母菌的原料 64.酵母菌进行有氧呼吸时产生 CO2 的场所是(C ) A、细胞质基质;B、核糖体 C、线粒体;D、叶绿体 65.下列反应中,消耗 1 摩尔葡萄糖产生 ATP 最多的是 ( A ) A、有氧呼吸; B、无氧呼吸 C、乳酸发酵; D、酒精发酵 66.谷氨酸发酵结束后,常用哪种方法进行提取( A )。 A 离子交换树脂法 B 膜过滤 C 凝胶电泳 D 沉淀法 67.下列有关有氧呼吸与无氧呼吸的相同点,不正确的是( D )

A.都有从葡萄糖分解成丙酮酸的过程 B.都有有机物的氧化分解 C.都有能量释放,并有 ATP 的生成 D.分解产物中都有 CO2 68.下列生理过程中,释放能量最多的是( A ) A.葡萄糖氧化分解为 CO2 和 H2O B.葡萄糖分解为酒精和 CO2 C.葡萄糖分解为乳酸 D.葡萄糖分解为甘油 69.在发酵工程中,( B ) 是发酵成功与否的关键。 A 无目标微生物 B 无目标微生物以外的微生物 C 无菌 D 无氧 70.( D )是生物技术产业化,发展大规模生产的最关键环节。 A 细胞工程和基因工程 B 细胞工程和酶工程 C 基因工程和酶工程; D 酶工 程和发酵工程 四、名词解释 1.fermentation engineering:发酵工程,是利用微生物特定性状和功能,通过现代化工程技术生
产用用的物质或直接用于工业化生产的技术体系,是将传统发酵与现代的 DNA 重组、细胞融合、分子修 饰和改造等新技术结合并发展起来的发酵技术。 2 种子扩大培养: 是指将保存在沙土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后, 再经过摇瓶及种子罐逐级放大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。该纯种培养物称为种子。 3 糖酵解: 葡萄糖经过 1,6-二磷酸果糖生成 3-磷酸甘油醛, 3-磷酸甘油醛再降解生成丙酮酸并产生 ATP 的代谢过程。 4 代谢控制发酵:人为的改变微生物的代谢调控机制,使有用中间代谢产物过量积累,这种发酵机制 称为代谢控制发酵。 5 分批补料培养技术:是指在分批培养过程中,间歇或连续的补加新鲜培养基的培养方法,又称半连 续培养或半连续发酵,是介于分批培养过程与连续培养过程之间的一种过渡培养方式。 6 连续发酵:是以一定的速度向培养系统内添加新鲜培养基,同时以相同的速度流出培养液,从而使 培养系统内培养液的量维持恒定,使微生物细胞能在近似恒定的状态下生长。也称连续发酵。 7 种子罐的级数:是指制备种子需要逐级扩大培养的次数,它决定于生产所用菌种的生长特性、孢子 发芽及菌体繁殖的速度、所用发酵罐的体积。 8 比生长速率μ:每小时单位质量的菌体所增加的菌体量称为菌体比生长速率。它是表征微生物生长 速率的一个参数,也是发酵动力学中的一个重要参数。其大小为 0.693 除以倍增时间 td(菌体量倍增) 。 9 菌种的衰退:菌种在培养或保藏过程中,由于自发突变的存在,出现某些原有优良生产性状的劣化、 遗传标记的丢失等现象,称为菌种衰退。 10 菌种的复壮:狭义的复壮:是在菌种已发生衰退的情况下,通过纯种分离和 测定生产性能等方法, 从衰退的群体中找出尚未衰退的个体,以达到恢复该菌原有性状的一种措施;广义的复壮:指在菌种的生 产性能尚未衰退前, 有意识地进行纯种分离和生产性能的测定工作, 以期菌种的生产性能逐步有所提高。 11 巴斯德效应:巴斯德发现的有氧氧化抑制糖的无氧酵解的作用。是有氧氧化产生了较多的 ATP 抑 制了糖酵解的一些酶所致,有利于能源物质的经济利用。 12 培养基:培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都 含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和 色素,用于单种微生物培养和鉴定。

13 菌体得率: 14 临界溶氧值:是指发酵液内氧垂曲线上氧垂点处的溶解氧量。 15 生长因子:微生物生长必须的,但又不能自己合成或合成量不能够满足自身需要的微量物质。 16 固定化酶: 水溶性酶经物理或化学方法处理后, 成为不溶于水的但仍具有酶活性的一种酶的衍生物。
在催化反应中以固相状态作用于底物。 17 初级代谢产物:是指微生物通过代谢活动所产生的,自身生长和繁殖所必须的物质,如氨基酸、核 苷酸,多糖、脂类、维生素等。 18 次级代谢产物: 是指微生物生长到一定阶段才产生的化学结构十分复杂、 对该生物无明显生理功能, 或并非是微生物生长和繁殖所必需的物质,如抗生素、毒素、激素、色素等。 19 营养缺陷型菌株: 野生型菌株经过人工诱变或者自然突变失去合成某种营养(氨基酸,维生素, 核酸等)的能力,只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子才能生长,成为营养缺陷型 (auxotroph) 。 20 巴斯德消毒法:亦称低温消毒法,冷杀菌法,是一种利用较低的温度既可杀死病菌又能保持物品中 营养物质风味不变的消毒法,现在常常被广义地用于定义需要杀死各种病原菌的热处理方法。

21 葡萄糖效应:葡萄糖存在的情况下,即使在细菌培养基中加入乳糖、半乳糖、阿拉伯糖或麦芽糖的
诱导物,与其相对应的操纵子也不会启动,不会产生出代写这些糖的酶来,这种现象叫葡萄糖效应或降 解抑制作用。 22 单细胞蛋白:也叫微生物蛋白,它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而, 单细胞蛋白不是一种纯蛋白质,而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、 维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 23 生物质能:绿色植物通过叶绿素将太阳能转化为化学能存储在生物质内部的能量。是太阳能以化学 能形式存储在生物质中的能量。 24 分批发酵:是指在一个密闭的系统内投入有限量的营养物质后,接入少量的微生物菌种进行培养, 使微生物生长繁殖,在特定的条件下只完成一个生长周期的微生物培养方法。 25 发酵动力学:生化反应工程的基础内容之一,以研究发酵过程的反应速率和环境因素对速率的 影响为主要内容。 26 无菌检查:发酵过程中生产菌以外的其他微生物侵入了发酵培养液均称为杂菌污染。无菌检查则是 利用显微镜检查、微生物培养检查等发现分析杂菌的根本原因。 27 种龄和接种量: 种龄是种子培养的时间。 接种量是指移入种子液的体积和接种后培养液体积的比例。 28 载体培养和两步法液体深层培养:载体培养:为了达到提高菌体的目的,噬菌体在合适的字体 或支撑物上进行培养;两步法液体深层培养:菌体生长和产酶量不同,现提供合适的生长条件,收集大 量的菌体再移入发酵培养基中进行发酵。一般步骤:菌体在丰富的培养基上大量的繁殖 → 收集菌体浓 缩物 → 洗涤 → 转接入添加诱导物的产酶培养基 29 种子制备:种子制备一般包括两个过程,即在固体培养基上生产大量孢子的制备过程和在液体培养 基中生产大量菌丝或营养体的种子制备过程。

五、简答题 1. 简答发酵工程的发展趋势。
1、采用基因工程、细胞工程技术与常规微生物育种方法结合,辅以激光、离子束、Y-射线等物理右边 方法,致力于选育发酵工业所需的各种优良生产菌种。 2、开发研制社会需要、附加值高的新兴发酵产品。 3、采用发酵工程技术取代部分传统化工产品的生产,降低原材料消耗和能源消耗,减少污染物排放。 4、研究开发发酵和提取新技术、新工艺、新设备,提高产品收率、节能降耗。 5、大规模工业化发酵生产技术。

2. 发酵生产中一旦发现染菌应采取哪些挽救措施? 答:发酵过程中一旦发现杂菌污染,首先应尽力寻找染菌的原因和途径,杜绝后患。同时对染菌的发酵
液要根据具体情况作出处理。如:发现种子染菌,应立即加热灭菌后废弃,绝不能将染菌种子接入发酵 罐,以免造成更大损失,如果是发现早期染菌,则可采取适当补充营养物,重新灭菌,再接种发酵;如 果在发酵后期染菌,而染菌又不影响生产菌株的正常发酵或不妨碍产品分离提纯,则可以让其“共生共 长” “和平共处”至发酵终了,否则就应该提前放罐。染菌后的挽救措施要根据不同生产菌株的特点、 产品性质以及各工厂的具体情况,采取可行办法。

6. 简述生物质能源具有的特点及开发利用的意义。 特点:1、燃放时污染小 2、蕴含量巨大,可再生 。3、具有普遍性、易取性特点。4、可储存和运输。
5、生物质能源挥发组分高,炭活性高,易燃。 意义:可缓解能源不足,增加经济收入,能减少污染,可持续利用是有利于人与自然和谐发展的重要能 源。

3. 简述对工业发酵过程进行监控的意义 答:在发酵过程中,优良菌株仅仅提供获得高产的可能性,要把这种可能性变成现实还必须给以必要的
环境条件。微生物对环境条件特别敏感,而他本身又具有多种代谢途径,环境条件的改变容易引起微生 物代谢的改变。所以对发酵过程进行监控,以便正确的掌握和控制发酵条件,对提高发酵产量具有十分 重要的意义。

4. 选择和配制发酵培养基应遵循哪些基本原则?
1、必须提供和成为生物细胞和发酵产物的基本成分; 2、所用的单位营养物质能产生最大量的微生物体活发酵产物; 3、能形成最大浓度的微生物体或产物; 4、能形成最大产物生成率、从而缩短发酵周期; 5、尽量较少副产物的形成,便于产物的分离纯化;

6、对生产中除发酵以外的其他方面如通气、搅拌、精致、废弃物的处理等带来的困难最少; 7、原料价格低廉、质量稳定、取材容易。

5. 一般情况下,典型的发酵过程可以划分为哪几个基本组成部分?
答:一般情况下分 6 部分: 1、繁殖菌种和发酵生产所用的培养基配置; 2、培养基、发酵罐以及辅助设备的消毒灭菌; 3、将以培养好的有活性的纯菌株以一定量接种到发酵罐中; 4、控制发酵罐中的菌株在最适条件下生长并形成代谢产物; 5、产物的提取和精致,以得到合格产品; 6、收回或处理发酵过程中所产生的废水、废物。

14.何谓细菌生长曲线?对微生物发酵生产有何指导意义? 细菌生长曲线是指单细胞微生物的。 它是将少量的单细胞微生物接种纯种到一定容积的液体培养基后,
在适宜条件下培养, 定时取样测定细胞数量。 以细胞增长数目的对数做纵坐标,以培养时间做横坐标, 绘制一条如图所示的曲线,我们称这条曲线为细菌的生长曲线。意义:可根据生长曲线的变化对其 生长过程进行调控,保证发酵过程的正常运转。

7. 简述氨基酸发酵的代谢控制措施。 8、写出酒母扩大培养的工艺流程。 扩大工艺流程:原菌→斜面试管 → 液体试管 → 三角瓶培养 → 卡氏罐 → 小酒母罐 → 大酒母罐
→ 成熟酒母送发酵车间

9、简述菌种保藏的原理。
菌种保藏主要是根据菌种的生理生化特点,人为创造条件使孢子或菌体的生长代谢活动尽量降低,以减 少其变异。

10、发酵过程中,除菌的意义何在? 答:发酵工业是利用某种特定的微生物在一定的环境中,惊醒新陈代谢,从而获得某种产品。发酵生产
要求纯种培养,不仅斜面、种子和培养基以及发酵罐、管道等须经严格灭菌除去各种杂菌,而且在需氧 发酵中通入的空气也须经楚军处理,只有这样才能确保生产不受杂菌污染,从而保证生产菌旺盛生长。 染菌的结果,轻者影响产量或产品质量,重者导致倒灌,甚至停产。工业发酵中污染杂菌造成的损失是 十分惊人的,所以必须认真对待除菌。

11.简述谷氨酸发酵机理 机理:谷氨酸的生物合成途径大致是:葡萄糖经糖酵解(EMP 途径)和己糖磷酸支路(HMP 途径)生成丙酮
酸,再氧化成乙酰辅酶 A(乙酰 COA),然后进入三羧酸循环,生成α -酮戊二酸。α -酮戊二酸在谷氨酸 脱氢酶的催化及有 NH4+存在的条件下,生成谷氨酸。当生物素缺乏时,菌种生长十分缓慢;当生物素过 量时,则转为乳酸发酵。因此,一般将生物素控制在亚适量条件下,才能得到高产量的谷氨酸。

12.有机酸发酵时,其产物经常改变培养液的 pH 或抑制发酵,生产上是如何解决这一问题 的? 13.简要叙述大规模生产时对培养基的基本要求。 15.为什么要选用高丝氨酸营养缺陷型作为赖氨酸生产菌株? 16、试述酸催化淀粉水解的作用机理 17. 什么是细菌生长曲线?可分为哪儿个阶段?各有什么特点? 18. 简述发酵食品形成的一般生化历程及各阶段的生化特征、主要反应及发生的主要物质 变化。 19. 发酵生产中一旦发现染菌应采取哪些挽救措施? 20. 简述对工业发酵过程进行监控的意义 21. 选择和配制发酵培养基应遵循哪些基本原则? 22. 一般情况下,典型的发酵过程可以划分为哪几个基本组成部分? 23、简述沼气发酵机理 24、简述发酵工程的概念、研究内容及应用。 25、发酵中为什么种子要逐级扩大培养?什么情况下可采用一级种子? 26、简述发酵工程的发展简史。 27、简述发酵工业一般的工艺流程。 28、简答发酵工程应用领域。 29、发酵动力学研究的内容有哪些?研究发酵动力学有何意义?

30、微生物发酵过程应该监测哪些发酵参数? 31. 试述以谷物为原料酿醋时参与的微生物种类及其作用。 32. 简述生物质能源具有的特点及开发利用的意义。 33. 简述氨基酸发酵的代谢控制措施。 34. 选择和配制发酵培养基应遵循哪些基本原则? 35. 简述微生物诱变育种技术中影响诱变效果的因素主要有哪些,应如何选择。 36.试述生长速率对细菌个体大小及其组分的影响。 37.判断一化合物对抗生素合成起诱导作用还是作为前体,其依据是什么? 38.试述组成型突变株的获得及富集方法。 39.简述车间种子制备时确定种子罐级数应考虑的因素及确定种子罐级数的一般方法。 六、论述题及应用题 1. 影响发酵过程的因素有哪些?在发酵工业中,如何进行发酵过程工艺控制?
温度 温度对微生物的影响是多方面的。首先,温度影响酶的活性。温度也能影响生物合成的途径。此外,温度还会影响 发酵液的物理性质,以及菌种对营养物质的分解吸收等。因此,要保证正常的发酵过程,就需维持发酵过程中各个阶段 的最适温度。 pH pH 能够影响酶的活性,以及细胞膜的带电荷状况。细胞膜的带电荷状况如果发生变化,膜的透性也会改变,从而 有可能影响微生物对营养物质的吸收及代谢产物的分泌。此外,pH 还会影响培养基中营养物质的分解等。因此,应控制 发酵液的 pH。但不同菌种生长阶段和合成产物阶段的最适 pH 往往不同,需要分别加以控制。 溶解氧 氧的供应对需氧发酵来说,是一个关键因素。从葡萄糖氧化的需氧量来看,1 mol 的葡萄糖彻底氧化分解,需 6 mol 的氧;当糖用于合成代谢产物时,1 mol 葡萄糖约需 1.9 mol 的氧。因此,好氧型微生物对氧的需要量是很大的,但 在发酵过程中菌种只能利用发酵液中的溶解氧,然而氧很难溶于水。在 101.32 kPa、25℃时,氧在水中的溶解度为 0.26 mmol/L。在同样条件下,氧在发酵液中的溶解度仅为 0.20 mmol/L。而且随着温度的升高,溶解度还会下降。因此,必须 向发酵液中连续补充大量的氧,经搅拌,可以提高氧在发酵液中的溶解度。 泡沫 在发酵过程中,通气搅拌、微生物的代谢过程及培养基中某些成分的分解等,都有可能产生泡沫。发酵过程中 产生一定数量的泡沫是正常现象,但过多的持久性泡沫对发酵是不利的。因为泡沫会占据发酵罐的容积,影响通气和搅 拌的正常进行,甚至导致代谢异常,因而必须消除泡沫。常用的消泡沫措施有两类:一类是安装消泡沫挡板,通过强烈 的机械振荡,促使泡沫破裂;另一类是使用消泡沫剂。 营养物质的浓度 发酵液中各种营养物质的浓度,特别是碳氮比、无机盐和维生素的浓度,会直接影响菌体的生长和代 谢产物的积累。如在谷氨酸发酵中,NH+4 浓度的变化,会影响代谢途径(见谷氨酸发酵)。因此,在发酵过程中,也应根 据具体情况进行控制。

2. 试述谷氨酸发酵中常见的异常发酵现象及其处理措施。
异常发酵:在谷氨酸发酵中往往出现这样的现象,发酵前期,耗糖慢、产酸低,糖酸转化率低,0D 值增长缓慢。发酵中 期耗糖才有所增加,产酸也有所提高。但在发酵后期,菌体活力明显下降,耗糖不产酸,糖酸转化率低,总体发酵产酸 水平比正常发酵低,糖酸转化率低。轻者产酸少 0.5-1 个百分点,重者少 2~3 个百分点,甚至更低。镜检看,菌体个头 小、发圆,产酸越低,菌体越小、越圆,甚至看似球菌而不是棒杆菌,排列不整齐不规则。这就是平常我们所说的异常 发酵。

处理措施: 3. 分析影响谷氨酸发酵产量的因素及其调控机制。
答:在谷氨酸发酵过程中,影响菌种代谢途径的因素有氧、温度、pH 和磷酸盐等,并且谷氨酸产生菌需 要生长因子──生物素。当生物素缺乏时,菌种生长十分缓慢;当生物素过量时,则转为乳酸发酵。因 此,一般将生物素控制在亚适量条件下,才能得到高产量的谷氨酸。 在谷氨酸发酵中,如果能够改变细胞膜的通透性,使谷氨酸不断地排到细胞外面,就会大量生成谷氨酸。 研究表明,影响细胞膜通透性的主要因素是细胞膜中的磷脂含量。因此,对谷氨酸产生菌的选育,往往 从控制磷脂的合成或使细胞膜受损伤入手,如生物素缺陷型菌种的选育。生物素是不饱和脂肪酸合成过 程中所需的乙酰 CoA 的辅酶。生物素缺陷型菌种因不能合成生物素,从而抑制了不饱和脂肪酸的合成。 而不饱和脂肪酸是磷脂的组成成分之一。因此,磷脂的合成量也相应减少,这就会导致细胞膜结构不完 整,提高细胞膜对谷氨酸的通透性。 在发酵过程中,氧、温度、pH 和磷酸盐等的调节和控制如下: ①氧。谷氨酸产生菌是好氧菌,通风和搅拌不仅会影响菌种对氮源和碳源的利用率,而且会影响发 酵周期和谷氨酸的合成量。尤其是在发酵后期,加大通气量有利于谷氨酸的合成。

②温度。菌种生长的最适温度为 30~32 ℃。当菌体生长到稳定期,适当提高温度有利于产酸,因 此,在发酵后期,可将温度提高到 34~37 ℃。 ③pH。谷氨酸产生菌发酵的最适 pH 在 7.0~8.0。但在发酵过程中,随着营养物质的利用,代谢产 物的积累,培养液的 pH 会不断变化。如随着氮源的利用,放出氨,pH 会上升;当糖被利用生成有机酸 时,pH 会下降。 ④磷酸盐。它是谷氨酸发酵过程中必需的,但浓度不能过高,否则会转向缬氨酸发酵。

4. 以你对发酵工程、工艺的理解,你认为目前发酵工业中急待解决的工程问题有哪些,研 究热点是什么?
答:生产中有许多难以解决的实际问题,如:工程方面的研究经验不足,实践经验尚未上升为系统清晰 的理论,产品发酵过程中存在许多问题,机理也不甚清楚。急待解决的问题有: 1、连续发酵虽然机理研究较多,但难以应用于实践,大规模连续发酵的建立。 2、由于菌种突变,及微生物的复杂性和多样性导致工艺条件稳定性差。 3、丝状真菌的发酵还没有较完善的理论指导,因此仍没有满足的设计和放大法,而霉菌、放线菌又是 发酵工业中占重要地位的菌类。 热点:利用基因工程技术有选择创造新物种;固定化酶和固定化细胞的生产和应用;生物传感器的研究 和设计,发酵过程控制技术。

6. 淀粉酶可以通过微生物发酵生产,为了提高酶的产最,请你设计一个实验,利用诱变育 种方法,获得产生淀粉酶较多的菌株。①写出主要实验步骤。②根据诱发突变率低和诱发 突变不定向性的特点预期实验结果。
一) 诱变 1. 菌悬液的制备 取已培养 20 h 的活化枯草芽孢杆菌斜面一支,用 10 mL 生理盐水将菌苔洗下,并倒入盛有玻璃珠的锥 形瓶中,强烈振荡 10 min,以打碎菌块,离心(3000 r/min)15min,弃上清液,将菌体用无菌生理盐水 洗涤 2 次,最后制成菌悬液,用血球计数板在显微镜下直接计数。调整细胞浓度为 108/mL。 2. 平板制作 将淀粉琼脂培养基熔化后,冷至 45℃左右倒平板。 3. 诱变处理 (1) 预热 正式照射前开启紫外灯预热 10 min。 (2) 搅拌 取制备好的菌悬液 4 mL 移入 6 cm 的无菌培养皿中,放入无菌磁力搅拌捧,置磁力搅拌器上, 20 W 紫外灯下 30 cm 处。 (3) 照射 然后打开皿盖边搅拌边照射,剂量分别为 1 min,2 min,3 min。可以累积照射,也可分别照 射不同时间。所有操作必须在红灯下进行。 4. 稀释涂平板 在红灯下分别取未照射的菌悬液(作为对照)和照射过的菌悬液各 0.5 mL 进行不同程度的稀释。取最后 3 个稀释度的稀释液涂于淀粉培养基平板上,每个稀释度涂 3 个平板,每个平板加稀释液 0.1 mL,用 无菌玻璃刮棒涂匀,37℃培养 48 h(用黑布包好平板)。注意在每个平板背后要标明处理时间、稀释度、 组别、座位号。 (二) 计篡存活率及致死率 1. 存活率 将培养 48 h 后的平板取出进行细胞计数。根据平板上菌落数,计算出对照样品 1 mL 菌液中的活菌数。 同样计算用紫外线处理 1、2、3min 后的存活细胞数及致死率。 三)观察诱变效应 在平板菌类计数后,分别向菌落数在 5~6 个左右的平板内加碘液数滴,在菌落周围将出现透明圈, 分别测量透明圈直径与菌落直径并计算比值(HC 值),与对照平板进行比较. 根据结果说明紫外线对枯草芽孢杆菌产淀粉酶诱变的效果,选取 HC 比值大的菌落移接到新鲜牛肉膏斜 面上培养。此斜面可作复筛用。

7. 如果希望从环境中分离得到一种厌氧自生固氮菌,你该如何设计实验?(写明实验目的、 方法和步骤) 目的:1、初步学会从土壤中分离自生固氮菌的方法 2、学会制作临时图片的方法

方法:将用地表土制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上培养,只有自生固氮菌能够繁殖,用这种方法,可
以讲自生固氮菌与其他杂菌分离开来。

步骤: 一、接种
1、接种前,将灭过菌的、盛有无氮培养基的培养皿,放在 37℃的恒温箱中一两天。随后,选取培养基上没 有生长人和微生物的培养皿供实验用。 2、取 10g 土壤,放入无菌研钵中,注入 5ml 无菌水,并用无菌玻璃棒搅拌你均匀,备用。 3、将接种环放在酒精灯的火焰上灭菌。略微打开培养皿盖,将接种环放在培养基边缘冷却。然后用接种环 挑去少许稀泥浆,轻点在培养皿的表面,共点 15-20 处。 4、接种后,轻轻地盖上培养皿盖,将培养皿放在实验桌上,并再盖上写明实验内容、接种人的姓名和接种 日期。 二、培养 将接种过的培养皿放入恒温箱内,在 28-30℃的温度下培养 3-4d。 三、观察 3-4d 后,取出培养皿,仔细观察培养基上稀泥浆周围长出的培养物—粘液。粘液初为无色透明, 以后为乳白色,最后变成褐色,表面含有自生固氮菌。 四、镜检 1、制作临时装片 (1)用镊子从存放载玻片的酒精缸里夹取一片载玻片,将载玻片放在酒精灯火焰上方缓缓烘烤,出去上面 的酒精。将载玻片放在桌面上,带载玻片冷却后,在中间滴一滴无菌水。 (2)在火焰旁,按照接种的要求,用灭过菌的接种环从培养基上挑取少许粘液,将粘液涂在载玻片的水滴上, 加 1 滴结晶紫染液,混合均匀,染色 1min。 (3)另取一片载玻片作推片。将推片自液滴左侧向右侧移动,使液滴均匀的附着在两片之间。然后,将推 片自由向左平稳的推移,两片之间呈 30-45 度夹角,推迟一层均匀的菌膜。 2 干燥 让临时涂片自然干燥(不用加热固定,以免破坏荚膜)。 3 在显微镜下观察 依次通过低倍镜到高倍镜观察临时装片,可以看到染成深紫色的自生固氮菌。

8.试设计一个从土壤中分离放线菌纯种的实验方案
从土壤中分离放线菌的步骤如下: 1.制作高氏一号培养基,趁热注入培养皿中,凝成平板,待用。 2.称取土壤 10 克,放入装有 100 毫升无菌水的锥形瓶中,并加入 10%酚 10 滴,以抑制细菌生长。振荡 10 分钟,制成 10:1 菌悬液。按照连续稀释分离法,进一步制成 10:3 菌悬液。 3.用移液管吸取 0.1 毫升 10:3 菌悬液,注入平板培养基上,用无菌玻璃刮刀将菌悬液均匀涂抹在整个 培养基上。然后将培养皿倒置于 25~30℃温箱中,培养 7~10 天,培养基上会出现微生医学教.整理物 菌落。如果菌落的硬度较大,干燥致密,且与基质紧密结合,不易被针挑起,这就是放线菌菌落。 4.挑取放线菌菌落,接种于斜面培养基上。


推荐相关:

发酵工程试题及答案

发酵工程试题及答案_自然科学_专业资料。发酵工程一...二、填空题 1、 微生物发酵培养(过程)方法主要有 ...文档贡献者 移民8023 贡献于2011-12-06 ...


发酵工程试题及答案

发酵工程试题及答案 一、名称解释 1、 前体 指某些化合物加入到发酵培养基中,...二、填空题 1、 微生物发酵培养(过程)方法主要有 分批 培养、补料分批 培养、...


发酵工程思考题(含答案)

发酵工程思考题(含答案) 发酵工程发酵工程隐藏>> 博学慎思,明辨笃行 发酵工程课后思考题第一章绪论 1、发酵及发酵工程定义? 答:它是应用微生物学等相关的自然科学...


发酵工程试题及答案

发酵工程试题及答案_从业资格考试_资格考试/认证_...二、填空题 6 1、 微生物发酵培养(过程)方法主要...华南理工大学2011年854发... 暂无评价 3页 3下载...


发酵工程试题及答案

发酵工程试题及答案_理学_高等教育_教育专区。发酵工程 一、名词解释 1、分批...二、填空题 1、 微生物发酵培养(过程)方法主要有 分批 培养、补料分批 培养、...


发酵工程 选择题(解答版)

发酵工程 选择题(解答版)_理学_高等教育_教育专区。单项选择题 1.控制细菌的抗...2013年注会设计统考真题及答案81份文档 笑话大全集 笑话大全爆笑版 幽默笑话大全...


2011年《发酵工程》参考题目

2011年《发酵工程》参考题目_工学_高等教育_教育专区。期末考试课参考的2011...发酵工程习题 2页 免费 发酵工程09试卷(含答案)... 3页 免费 微生物发酵工程...


发酵工程试题库

微生物的代谢调控机制,使有用中间代谢产物过量积累,这种 发酵称为代谢控制发酵。...二、判断改错题 1.人工诱变、细胞工程、基因工程等都能对微生物进行定向改造。...


发酵工程试题与答案

发酵工程试题与答案_理学_高等教育_教育专区。一.名词解释 发酵工程:利用微生物...有机氮源是这些生长因子的重要来源 三.问答题 1.论述液体深层发酵生产有哪些...


发酵工程课后题参考答案

发酵课后题参考答案第一章 一.发酵工程技术的发展大致可分为那几个阶段?每个阶段...发酵经济学生技 0505 孙汉资 黄文明 1、 影响发酵产品成本的主要因素有哪些。...

网站首页 | 网站地图
All rights reserved Powered by 简单学习网 www.tceic.com
copyright ©right 2010-2021。
文档资料库内容来自网络,如有侵犯请联系客服。zhit325@126.com