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第02章核酸化学2


第二章

核酸的结构和功能
Structure and Function of Nucleic Acid

目录

核 酸(nucleic acid)
是以核苷酸为基本组成单位的生物大 分子,携带和传递遗传信息。

目录

一、核酸的发现和研究工作进展

/>? 1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” ? 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 ? 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 ? 1968年 Nirenberg发现遗传密码

? 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶
? 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法 ? 1985年 Mullis发明PCR 技术 ? 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) ? 1994年 中国人类基因组计划启动

? 2001年 美、英等国完成人类基因组计划基本框架
目录

二、核酸的分类及分布
核酸按其所含戊糖种类不同而分为两大类

脱氧核糖核酸
(deoxyribonucleic acid, DNA)

携带遗传信息,决定细胞和个 体的基因型(genotype)。

参与细胞内DNA遗传信息的表 核糖核酸 达。某些病毒RNA也可作为遗 (ribonucleic acid, RNA) 传信息的载体。
目录

核糖核酸 (RNA):按功能不同分为三大类 tRNA 转运RNA(15%) rRNA 核糖体RNA (80%) mRNA 信使RNA (5%) 小分子细胞核RNA(snRNA) 染色质RNA(chRNA)

三、核酸的分布
DNA集中在核质区 原核细胞内 RNA分散在细胞质中 95%细胞核中 DNA 5%线粒体及叶绿体中 真核细胞内 75%细胞质中 RNA 15%线粒体及叶绿体中 10%细胞核中

目录

第一节 核酸的化学组成及其一级结构
The Chemical Component and Primary
Structure of Nucleic Acid

目录

核酸的化学组成
1. 元素组成

C、H、O、N、P(9~10%)
2. 分子组成 —— 碱基(base):嘌呤碱,嘧啶碱

—— 戊糖(ribose):核糖,脱氧核糖
—— 磷酸(phosphate)
目录

核酸的元素组成
基本元素:C H O N P 核酸的元素组成有两个特点: 1. 一般不含S 2. P含量较多,并且恒定(9%-10%)。 因此,实验室中用定磷法进行核酸的定量 分析。(DNA9.9% 、RNA9.5%)

目录

核酸的分子组成
核酸
核苷酸



磷酸

核苷



戊糖

碱基

目录





核苷酸

代表戊糖,对DNA而言为脱氧核糖,对RNA 而言为核糖; 代表碱基 代表磷酸基
目录

碱 基
N

NH2 N

嘌呤(purine)
N 7 8 9 NH
NH N

5 4

6 3 N

1N 2

腺嘌呤(adenine, A)
O N

NH

NH

鸟嘌呤(guanine, G)

N

NH2
目录

嘧啶(pyrimidine)
5 4 3 2 N

O

NH

6 1 NH
NH2

NH

O

尿嘧啶(uracil, U)
O H3C

N
NH

NH

NH

O

O
目录

胞嘧啶(cytosine, C)

胸腺嘧啶(thymine, T)

RNA

DNA

胞嘧啶 C

尿嘧啶 U 腺嘌呤 A

胸腺嘧啶 T

鸟嘌呤 G

目录

稀有碱基
? 嘌呤——次黄嘌呤、1-甲基次黄嘌呤、N2、 N2-二甲基鸟嘌呤。
? 嘧啶——5-甲基胞嘧啶、5-羟甲基胞嘧啶、 二氢尿嘧啶、4-巯尿嘧啶 ? 都是基本碱基的化学修饰型。

目录

1-甲基次黄嘌呤

O N

O N

N
N
N H

H3C
N

N
N H

H2N

鸟嘌呤

次黄嘌呤

目录

CH3

胞嘧啶(C)

5-甲基胞嘧啶

目录

戊 糖
HO CH2 5? O OH HO CH2 O OH

4? 3?
OH

1? 2?
OH OH

核糖(ribose) (构成RNA)

脱氧核糖(deoxyribose) (构成DNA)
目录

一、核苷酸的结构
1. 核苷(ribonucleoside)的形成
碱基和核糖(脱氧核糖)通过糖 苷键连接形成核苷(脱氧核苷)。
HO CH 2 NH2 N

1
O N O

核苷:AR, GR, UR, CR
脱氧核苷:dAR, dGR, dTR, dCR

1?

OH OH
目录

2. 核苷酸(ribonucleotide)的结构与命名
核苷(脱氧核苷)和磷酸以磷酸酯键 连接形成核苷酸(脱氧核苷酸)。
O HO O CH CH2 P HO 2 OH OH OH OH
目录

NH2 N
O O

N

核苷酸: 脱氧核苷酸:

O

AMP, GMP, UMP, CMP

dAMP, dGMP, dTMP, dCMP

核苷酸
磷 酸 碱 基

戊糖
目录

O
NH
碱基

N N
酯键

N
N H

HN O N H
H2 O 糖苷键

O
磷酸 O P OH HOCH 2 O

OH

O
H2O OH OH 戊糖
目录

酯键

5` 4` 3` 2` 1`

碱基连接(糖苷键)

(对DNA为H)
目录

体内重要的游离核苷酸及其衍生物
? ? ?

多磷酸核苷酸:NMP,NDP,NTP
环化核苷酸: cAMP,cGMP 含核苷酸的生物活性物质:
NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP
NH NH 2 NH 2 2 N NN

NH2 N N N

O O N NN HO N CH HO P O PP PP O OO CH CH 2 HO OO P NN 2 2O O O OH OH OH OH OH OH cAMP
O OO

O

N NN

O

CH2

N O

ADP AMP ATP NAD+

O
OH OH OH OH OH OH

P

O

OH

OH NADP+

(四)核苷酸的生物学作用
(1)参与DNA、RNA的合成、蛋白质的 合成、糖与磷脂的合成。 (2)在能量转化中起重要作用,ATP是生 物体内能量的通用货币。 (3)是构成多种辅酶的成分:NAD、 NADP、FAD、FMN和CoA。 (4)参与细胞中的代谢与调节(cAMP、 cGMP)。
目录

5?端

C

3. 核苷酸的连接
核苷酸之间以 磷酸二酯键连接形
A

成多核苷酸链,即
核酸。
G

3?端

目录

5′端

二、核酸的一级结构
定义
核酸中核苷酸的排 列顺序。 由于核苷酸间的差 异主要是碱基不同,所 以也称为碱基序列。

C

A

G

3′端
目录

书写方法

A

G

T

G

C

T

5? P

P

P

P

P

P

OH 3?

5? pApCpTpGpCpT-OH 3?

5? A C T G C T 3 ?
目录

第二节 DNA的空间结构与功能
Dimensional Structure and Function of DNA

目录

? DNA的二级结构-双螺旋结构 – DNA双螺旋结构的研究背景和历史意义 – DNA双螺旋结构模型要点 ? DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装 – DNA的超螺旋结构 – 原核生物DNA的高级结构 – DNA在真核生物细胞核内的组装

? DNA的功能
目录

一、 DNA的二级结构 ——双螺旋结构

目录

(一)DNA双螺旋结构的研究背景
碱基组成分析
Chargaff 规则:[A] = [T] [G] ? [C]

碱基的理化数据分析 A-T、G-C以氢键配对较合理
DNA纤维的X-线衍射图谱分析
目录

DNA的碱基组成特点——Chargaff定律
?(1)所有DNA中腺嘌呤与胸腺嘧啶的摩尔 含量相等,(即A=T);鸟嘌呤与胞嘌呤的摩 尔含量相等,(即G=C)。碱基当量定律: 嘌呤碱总量=嘧啶碱总量。(即A+G=T+C) ?(2)不同生物DNA的碱基组成有很大差异, 可用不对称比率:A+T/G+C表示。亲缘相近 的生物,其DNA的碱基组成相近,即不对称 比率相近。 ?(3)同一种生物所有体细胞DNA的碱基组 成相同,可作为该物种的特征。
目录

1、没有器官或组织特异性 ? 2、不随生物体的年龄、 营养状态或者环境的变化而改变 ? 3、[A]=[T],[G]=[C]; [A]+[G]=[C]+[T] ? 4、具有种的特异性
?

目录

(二) DNA双螺旋结构模型要点
(Watson, Crick, 1953)

? DNA分子由两条相互平行但
走向相反的脱氧多核苷酸链

组成,两链以 - 脱氧核糖 - 磷
酸 - 为骨架,以右手螺旋方 式绕同一公共轴盘。螺旋直 径为 2nm ,形成大沟 (major groove) 及 小 沟 (minor

groove)相间。
目录

(二) DNA双螺旋结构模型要点
(Watson, Crick, 1953)

? 碱基垂直螺旋轴居双螺旋内

側,与对側碱基形成氢键配
对 ( 互 补 配 对 形 式 : A=T;

G?C) 。
? 相邻碱基平面距离0.34nm, 螺旋一圈螺距3.4nm,一圈 10对碱基。
目录

腺嘌呤

胸腺嘧啶

其他组合易相 互排斥 例如 G:T
胞嘧啶 鸟嘌呤

*因此,DNA 的双股系藉著 A:T 和 G : C的 配对关系互 相 结合 。
目录

A-T配对 G-C配对
目录

(二) DNA双螺旋结构模型要点
(Watson, Crick, 1953)

? 氢键维持双链横向稳定
性,碱基堆积力维持双

链纵向稳定性。
离子键磷酸基团上的负电荷 与介质中的阳离子或阳离子

化合物之间所形成的盐键
目录

双螺旋中的大沟 对于DNA和蛋白质 结合时的相互识别很 重要 ,在沟内可以 辨认碱基的顺序。

计算机模拟DNA双 螺旋结构(蓝色) 大沟中结合着蛋白 质(红色)
目录

DNA双螺旋的类型
(1)B-DNA螺旋: DNA在92%相对湿度的钠盐中 的构型。标准的 右手双螺旋,细胞正常状态 下DNA存在的构型。 (2)A-DNA螺旋:DNA在75%相对湿度的钠盐中的 构型。 (3)Z-DNA螺旋:左手的DNA螺旋,这种螺旋可 能在基因表达的调控中起作用。

(4)H-DNA螺旋:三螺旋结构,又称三链 DNA(tsDNA)
目录

(三)DNA双螺旋结构的多样性

目录

B-DNA & Z-DNA

目录

与DNA碱基顺序有关的特殊二级结构
(1)核酸分子中的回文序列

回文序列中的单 链可形成发卡结构

目录

(1)核酸分子中的回文序列

双链回文序列可 形成十字架结构

目录

(2) 镜象结构
所谓镜象结构就是指DNA某一片段在一条 链上出现颠倒重复的序列。

目录

(3)三股螺旋 多嘌呤-多嘧啶的镜象序列可形成三股 螺旋结构(H-螺旋或Hoogsteen螺旋): 该 螺旋常处在许多真核细胞基因的表达调节

区。可能与基因表达的调节有关.

目录

三股螺旋

目录

目录

(4)四链DNA:可能存在于真核细胞染色体的端粒中。

目录

DNA的三级结构

定义:是指双螺旋进一步扭曲形成的更高层次的
空间结构,也就是比双螺旋更为复杂的构象。 线状DNA形成的纽结、超螺旋和多重螺旋 类型 环状DNA形成的结、超螺旋和连环 DNA的三级结构主要是指双螺旋进一步扭曲 形成的超螺旋。 超螺旋即DNA双螺旋的螺旋。

目录

(一)DNA的超螺旋结构
超螺旋结构(superhelix 或supercoil) DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。

正超螺旋(positive supercoil) 盘绕方向与DNA双螺旋方同相同 负超螺旋(negative supercoil) 盘绕方向与DNA双螺旋方向相反
目录

意义 DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学 变化及其调控对于DNA复制和RNA转录过 程具有关键作用。

目录

(二)原核生物DNA的高级结构

目录

(三)DNA在真核生物细胞核内的组装
真核生物染色体由 DNA 和蛋白质构成,

其基本单位是 核小体(nucleosome)。
核小体的组成 DNA:约200bp

组蛋白:H1 H2A,H2B H3 H4
目录

目录

目录

DNA的功能
DNA的基本功能是以基因的形式荷载遗 传信息,并作为基因复制和转录的模板。它 是生命遗传的物质基础,也是个体生命活动 的信息基础。 基因从结构上定义,是指DNA分子中的 特定区段,其中的核苷酸排列顺序决定了基 因的功能。
目录

第三节

RNA的结构与功能
Structure and Function of RNA

目录

RNA的种类、分布、功能
细胞核和胞液 核蛋白体RNA 信使RNA 转运RNA 核内不均一RNA 核内小RNA 核仁小RNA 胞浆小RNA rRNA mRNA tRNA HnRNA SnRNA SnoRNA scRNA/7SL-RNA 线粒体 mt rRNA mt tRNA 功 能 核蛋白体组分 转运氨基酸 成熟mRNA的前体 参与hnRNA的剪接、转运 rRNA的加工、修饰 蛋白质内质网定位合成 的信号识别体的组分
目录

mt mRNA 蛋白质合成模板

RNA的结构
RNA的一级结构是由数量极其庞大的四种核糖核酸 (AMP、GMP、CMP、UMP)按一定顺序,通过 3?,5?—磷酸二酯键连成的线形分子,其表示方法与 DNA相同。 RNA的二级结构是短的,不完全螺旋的多核苷酸链。 (天然RNA并不像DNA一样都是双螺旋结构,而是单 链线形分子。只有局部区域为双螺旋结构。双螺旋区 约占RNA分子的50%) RNA的三级结构是在茎环结构基础上进一步扭曲折 叠而成的复杂结构。
目录

一 、信使RNA的结构与功能
?信使RNA(messenger RNA,mRNA) ?不均一核RNA(heterogeneou nuclear RNA,hnRNA): 在细胞核内合成的 mRNA的初级产物,经过剪接成为成熟 的mRNA并移到细胞质。 ?mRNA的功能:是把核内DNA的碱基顺 序按照碱基互补的原则,抄录并转送至 胞质,指导蛋白质的合成。
目录

mRNA的成熟过程

目录

mRNA一级结构的特点
? 真核生物成熟mRNA的结构特点及与原核生物的 区别: 1、5’端帽子结构(cap sequence): m7G5’ppp5’Nm5’-末端的G的N7被甲基化。鸟嘌呤核苷酸焦磷酸 与相邻的一个核苷酸相连,形成5’,5’-磷酸二酯键。 帽子结构能促进核蛋白体与mRNA的结合加速翻 译起始速度,同时可以增强mRNA的稳定性。 原核生物无此结构
目录

mRNA的帽子结构

目录

2、3’末端多聚A的尾巴。
极大多数真核细胞mRNA在3’-末端有一段长约 20—200个多聚腺苷酸的polyA。 polyA是在转录后 经polyA聚合酶的作用而添加上去的。 原核生物无些结构 polyA的功能: 1、与mRNA从细胞核转移到细胞质有关; 2、与mRNA的半寿期有关,新合成的mRNA, polyA链较长,而衰老的mRNA ,polyA链缩短。

目录

3、真核生物mRNA是单顺反子的,而原 核生物的mRNA是多顺反子的。 顺反子:是由顺反试验所规定的遗传单位 相当于一个基因,含有决定一种蛋白质氨 基酸序列的全部核苷酸序列。 多顺反子:是指携带一种以上蛋白质合成 信息的mRNA 也就是说:原核生物mRNA可编码几条不 同的多肽链。 单顺反子:只编码一条多肽链。
目录

* mRNA的功能 把 DNA 所携带的遗传信息,按碱基互 补配对原则,抄录并传送至核糖体,用以决 定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。
原核细胞 真核细胞
细胞质

DNA
转录

外显子

细胞核

内含子

DNA 转录 hnRNA

mRNA
翻译
蛋白

转录后剪接 转运

mRNA

翻译
蛋白

目录

二、转运RNA的结构与功能
* tRNA的一级结构特点 ? 含 10~20% 稀有碱基,如 DHU ? 3?末端为 — CCA-OH ? 5?末端大多数为G

? 具有 T?C

目录

O N NH N NH N

稀有碱基
H H

O NH NH O

CH3

H H

N,N二甲基鸟嘌呤
HN N NH N CH2 N

CH3
CH C CH3 CH3

双氢尿嘧啶 S

NH NH O 4-巯尿嘧啶
目录

N6-异戊烯腺嘌呤

* tRNA的二级结构 ——三叶草形
? 氨基酸臂 ? DHU环 ? 反密码环 ? 额外环
额外环

氨基酸臂

? TΨC环

目录

tRNA的三叶草型二级结构
RNA中的碱基配对 原则 A-U G-C
二氢尿嘧 啶环 识别氨酰 tRNA合 成酶 1

不同的tRNA 具有不同的 载运氨基酸 额外环,所 以额外环是 tRNA分类的 臂 重要指标
4

3
2

叶子
TΨC环,识 别核糖体

稀有碱基 次黄嘌呤

额外环 反密码子环 反密码子

目录

* tRNA的三级结构 —— 倒L形 * tRNA的功能 活化、搬运氨基 酸到核糖体,参与蛋 白质的翻译。
目录

三、核蛋白体RNA的结构与功能
* rRNA的结构
* rRNA的功能 参与组成核蛋白 体,作为蛋白质生物 合成的场所。

目录

* rRNA的种类(根据沉降系数)

真核生物
5S rRNA

原核生物
5S rRNA

28S rRNA
5.8S rRNA 18S rRNA

23S rRNA
16S rRNA

目录

核蛋白体的组成
原核生物(以大肠杆菌为例) 真核生物(以小鼠肝为例)
小亚基 30S 40S

rRNA
蛋白质

16S
21种

1542个核苷酸
占总重量的40%

18S
33种

1874个核苷酸
占总重量的50%

大亚基 rRNA 23S 5S 31种

50S 2940个核苷酸 120个核苷酸 占总重量的30% 28S 5.85S 5S 49种

60S 4718个核苷酸 160个核苷酸 120个核苷酸 占总重量的35%
目录

蛋白质

四 、其他小分子RNA及RNA组学
snmRNAs 除了上述三种 RNA 外,细胞的不同部位 存在的许多其他种类的小分子 RNA ,统称为 非mRNA小RNA(small non-messenger RNAs, snmRNAs)。

目录

snmRNAs的种类

核内小RNA
核仁小RNA

胞质小RNA
催化性小RNA 小片段干涉 RNA snmRNAs的功能 参与hnRNA和rRNA的加工和转运。
目录

RNA组学
RNA组学研究细胞中 snmRNAs 的种类、 结构和功能。同一生物体内不同种类的细胞、 同一细胞在不同时间、不同状态下 snmRNAs 的表达具有时间和空间特异性。

目录

第四节 核酸的理化性质
The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid

目录

核酸的水解
(一) 酸水解 糖苷键比磷酸酯键 更易水解,特别是嘌呤 与脱氧核糖之间的糖苷 键很容易水解。 (二) 碱水解 通常用于RNA水解, DNA的碱水解比较困难。

一、核酸水解

DNA易被 酸水解 RNA易被 碱水解
目录

(三)酶水解
食物核蛋白 胃酸 蛋白质 核 酸 ( RNA,DNA) 胰核酸酶 脱氧核糖核酸酶 氨基酸 (磷酸二酯酶) 单核苷酸 nucleotide nucleic acid

核糖核酸酶

胰肠核苷酸酶 (磷酸单酯酶) 磷酸 phosphate 核苷 核苷酶 碱基 purine pyrimidine 戊糖 (磷酸戊糖) ribose sugar deoxyribose

base

目录

核酸酶是指所有可以水解核酸的酶
?依据底物不同分类
?

DNA酶(deoxyribonuclease, DNase):
专一降解DNA。 RNA酶 (ribonuclease, RNase): 专一降解RNA。

?

?依据切割部位不同
?

核酸内切酶:分为限制性核酸内切酶和非 特异性限制性核酸内切酶。

?

核酸外切酶:5?→3?或3?→5?核酸外切酶。
目录

蛇毒磷酸二酯酶

(三) 酶水解 ? Snake venom phosphodiesterase and spleen phosphodiesterase are exonucleases that degrade polynucleotides from opposite ends.
?
牛脾磷酸二酯酶

Snake venom phosphodiesterase and spleen phosphodiesterase are exonucleases that degrade polynucleotides from opposite ends. 目 录

目录

限制性核酸内切酶 (Restriction endonuclease)
具有识别双链DNA分子中特定核苷酸序 列,并由此切割DNA双链的核酸内切酶 统称为限制性核酸内切酶 ? 发现: ? 1952, Smith Human 用T4 phage 感染 E.coli. 提出了限制与修饰现象。
?

目录

分类
Type I
功能 内切酶 & 甲基化酶

Type II
内切酶

Type III
内切酶

反应条件

ATP, Mg2+

Mg2+

ATP, Mg2+

识别序列

EcoK: AACN6GTGC EcoB: TGAN8TGCT 至少 1000bp 远

Palindromic(回文 序列) 识别序列的附近

EcoP1: AGACC EcoP15: CAGCAG 识别序列24-26 bp 左右

切点

目录

命名:三字母: 属名+种名+株名

目录

限制性酶切形式

5’ 突出端

3’ 突出端

粘性末端
5’-CCCGGG-3’ 3’-GGGCCC-5’ SmaI 5’-CCC-OH + 3’-GGG- p p -GGG-3’ OH-CCC-5’
目录

齐末端、平端

核酸酶的功能
生物体内的核酸酶负责细胞内外催化核酸的降解

? 参与 DNA 的合成与修复及 RNA 合成后的剪
接等重要基因复制和基因表达过程

? 负责清除多余的、结构和功能异常的核酸,
同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸 ? 在消化液中降解食物中的核酸以利吸收 ? 体外重组DNA技术中的重要工具酶
目录

目录

OD260的应用
1. DNA或RNA的定量
OD260=1.0相当于

50μg/ml双链DNA
40μg/ml单链DNA(或RNA) 20μg/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0
目录

二、DNA的变性(denaturation)
定义:在某些理化因素作用下,DNA双链解开 成两条单链的过程。 方法:过量酸,碱,加热,变性试剂如尿素、 酰胺以及某些有机溶剂如乙醇、丙酮等。 变性后其它理化性质变化:
OD260增高 粘度下降

比旋度下降

浮力密度升高

酸碱滴定曲线改变 生物活性丧失
目录

DNA变性的本质是双链间氢键的断裂

目录

例:变性引起紫外吸收值的改变

DNA的紫外吸收光谱 ? 增色效应:DNA变性时其溶液OD260增高的现象。
目录

热变性

?解链曲线:如果在连续加热DNA的过程中以

温度对 A260 ( absorbance , A , A260 代表溶液在 260nm处的吸光率)值作图,所得的曲线称为解 链曲线。 目录

? Tm : 变性是在一个相当窄的温度范围内完成,

在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的 50%时的温度称为DNA的解链温度,又称融解 温 度 (melting temperature, Tm) 。 其 大 小 与 G+C含量成正比。
目录

变性温度的特点
爆发式:热变性是在变性温度范围内突 发的跃变过程,很像结晶达到熔点时的 熔化现象,故名熔解温度

狭窄性:变性温度范围很小

目录

?DNA的Tm值大小与下列因素有关:
(1)DNA的均一性 均一性愈高的样品,熔解过程愈是发生在 一个很小的温度范围内。 (2)G—C之含量 G—C含量越高,Tm值越高,成正比关系, 这是G—C对比A—-T对更为稳定的缘故。 所以测定Tm值可推算出G—C对的含量。其 经验公式为: G—C(%)=(Tm-69.3)×2.44
目录

(3)介质中的离子强度

一般说来,在离子强度较低的介质中, DNA的熔解温度较低,熔解温度的范围也较 窄。而在较高的离子强度的介质中,情况则 相反。所以DNA制品应保存在较高浓度的缓 冲液中或溶液中,故常在1 mol/L的NaCl中 保存。
(4)变性剂 尿素、甲酰胺等 RNA分子中有局部的双螺旋区,所以RNA 也可发生变性,但Tm值较低,变性曲线也不 那么陡。

目录

三、DNA的复性与分子杂交
DNA复性(renaturation)的定义 在适当条件下,变性DNA的两条互补链可

恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。
热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性, 这一过程称为退火(annealing) 。 减色效应 DNA复性时,其溶液OD260降低。
目录

核酸分子杂交(hybridization)
在 DNA 变性后的复性过程中,如果将不
同种类的DNA单链分子或 RNA分子放在同一

溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定
程度的碱基配对关系,在适宜的条件(温度 及离子强度)下,就可以在不同的分子间形

成杂化双链(heteroduplex)。
这种杂化双链可以在不同的 DNA与 DNA

之间形成,也可以在DNA和RNA分子间或者
RNA与 RNA分子间形成。这种现象称为核酸 分子杂交。
目录

目录

目录

目录

核 酸 的 分 子 杂 交

目录

目录

目录

目录

核酸分子杂交的应用
研究DNA分子中某一种基因的位置

定两种核酸分子间的序列相似性
检测某些专一序列在待检样品中存在与否

是基因芯片技术的基础

目录


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第二章核酸化学(时限:90 分钟 测试类型:生物化学简明教程) 一、填空题(每空 1 分,共 52 分) 1、 核酸的基本结构单位是__ __,脱氧核糖核酸在糖环___位置...


第2章--核酸化学习题

第2章--核酸化学习题 隐藏>> 第二章一、名词解释: 核酸化学 1. 磷酸二酯键: 核酸分子中前一个核苷酸的 3`-羟基和下一个核苷酸的 5`-磷酸脱水缩合形 成的...


第二章 核酸化学练习

第二章一、解释名词: 核酸化学 (1)磷酸二酯键; (2)碱基互补规律;(3) 减色效应; (4)增色效应; (5)分子杂交 (6)DNA 的熔解温度(Tm 值) 二、是非判断...


生物化学教案 第二章 核酸的化学

生物化学教案 第二章 核酸化学_医学_高等教育_教育专区。生物化学 人民卫生出版社第2版教案 授课教师 授课章节 授课题目 第四节 核酸的化学 授课班级 第二章 ...

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